詳細介紹
運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對照時,由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專門的區(qū)域操作。本試劑盒不但準確、快速、靈敏,還具有以下
產(chǎn)品名稱 | 安氏網(wǎng)尾線蟲進口PCR試劑 |
英文名稱 | Dictyocaulus arnfieldiPCR |
分類 | PCR檢測試劑盒 |
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單。
2. 預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 494 bp。
3. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
LISA Kit Human Interleukin 28A,IL-28A/IFN-λ2 ELISA kit
人白介素26(IL-26)ELISA Kit Human Interleukin 26,IL-26 ELISA Kit
人白介素25(IL-25)ELISA Kit Human Interleukin 25,IL-25 ELISA kit
人白介素23受體(IL
淋巴瘤11/鋅指蛋白856抗體 PDI ELISA Kit 蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)ELISA試劑盒
B淋巴細胞白血病/淋巴瘤11B抗體 PLP ELISA Kit 蛋白脂質(zhì)蛋白抗體(PLP)ELISA試劑盒
鈣平衡調(diào)節(jié)蛋白1抗體 PIF/DCD ELISA Kit 蛋白水解誘導因子/皮離蛋白(PIF/DCD)ELISA試劑盒
阿爾茨海默病淀粉樣蛋白相關(guān)膠原蛋白抗體 PSME2 ELISA Kit 蛋白酶激活復合體亞基2(PSME2)ELISA試劑盒
老年癡呆相關(guān)類鈣粘蛋白CS1抗體 PR3-ANCA ELISA Kit 蛋白酶3特異性抗中性粒細胞胞質(zhì)抗體(PR3-ANCA)ELISA試劑盒
細胞凋亡誘導蛋白NALP3抗體 PR3Ab ELISA Kit 蛋白酶3抗體(PR3Ab)ELISA試劑盒
豬圓環(huán)病毒Ⅱ型衣殼蛋白抗體 PR3 ELISA Kit 蛋白酶3(PR3)ELISA試劑盒
血管加壓素激活鈣啟動受體蛋白1抗體 PPP1R1A ELISA Kit 蛋白磷酸酶1調(diào)控/抑制因子亞基1A(PPP1R1A)ELISA試劑盒
干細胞生長因子受體/細胞表面分化抗原抗體抗體 PP ELISA Kit 蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒
安氏網(wǎng)尾線蟲進口PCR試劑氯離子通道蛋白6抗體 PTP1B ELI
-23R)ELISA Kit Human IL-23R ELISA Kit
人白介素23A(IL-23A)EK-4)ELISA Kit Human IRAK-4 ELISA Kit
人白介素1受體相關(guān)激酶1(IRAK1)ELISA Kit
Q-PCR技術(shù):
實時熒光定量PCR(real-time quantitative PCR)/QRT-PCR,是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光標記物,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,后通過擴增曲線對未知模板進行定量分析的方法。熒光定量PCR不僅實現(xiàn)真正實現(xiàn)了定量,而且具有靈敏度和特異性、高能實現(xiàn)多重反應(yīng)、自動化程度高、無污染、實時和準確等特點。
熒光定量PCR所使用的熒光基團可分為兩種:熒光探針和熒光染料。
1.使用SYBR熒光染料法來進行熒光定量PCR時,我們首先在PCR反應(yīng)體系中加入過量SYBR熒光染料。SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后發(fā)射一定量的熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
2.Taqman探針則是利用探針與模板的特異性結(jié)合的特點,以及探針內(nèi)熒光報告基團和淬滅基團的分子特性來實現(xiàn)對PCR進行定量檢測。這種方法可以實現(xiàn)高靈敏度,嚴格針對特定堿基序列的定量實驗。