詳細介紹
產品名稱:豬輪狀病毒通用PCR試劑免費代測
英文名稱:Porcine rotavirus RTPCR
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
PCR實驗外包服務:
PCR起源:熒光定量PCR(也稱TaqMan PCR,以下簡稱FQ-PCR)是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術,該技術是在常規PCR基礎上加入熒光標記探針來實現其定量功能的,與變通PCR相比,FQ-PCR具有許多優點。與普通PCR相比,FQ-PCR具有許多優點:1、封閉反應,無需PCR后處理。2、特異性強,靈敏度高。3、采用對數期分析,摒棄終點數據,定量準確。4、定量范圍寬,可達到10個數量級。5、儀器在線式實時檢測,結果直觀,避免人為判斷。6、可實現一管雙檢或多檢。7、操作安全,縮短時間,提高效率。熒光定量 PCR是 通過對 PCR 擴增反應中每一個循環產物熒光信號的實時檢測從而實現對起始模板定量及定性的分析。
注意事項:
1.基礎程序;
2.擴增溫度和延伸溫度;
3.反應時間;
4.循環次數;
5.PCR 反應液的配制;
6.PCR技術的基本原理;
7.PCR的反應動力學;
8.PCR擴增產物;
9.PCR反應體系與反應條件。
【結果分析條件設定】
u 基線(Baseline)設定:應選擇該次實驗指數擴增前所有樣本熒光信號比較穩定的一段區域(所有樣本熒光信號無較大波動),起始點(Start)應避開熒光采集起始階段的信號波動,終止點(End)應比早出現指數擴增的樣本Ct值減少1~3個循環,建議基線設為6~15。
u 閾值(Threshold)設定:將閾值線設定在剛好超過正常陰性質控品擴增曲線的點。
【質控標準】
1. 陰性質控品的檢測結果應為陰性,無指數擴增期,Ct=40或無Ct;
2. 陽性質控品的檢測結果應為陽性,有明顯的指數擴增期,Ct值應小于等于35;
3. 以上要求需在一次實驗中同時滿足,否則該次實驗視為無效。
【結果判斷】
1. 陽性:有明顯的指數擴增期,且Ct<38;
2.可疑:有明顯的指數擴增期,且38≤Ct<40,此時樣本為可疑樣本;對于可疑樣本建議復核一次,若復核結果Ct<40且有指數擴增期,則判定為陽性,否則判定為陰性;
3. 陰性:無指數擴增期,Ct=40或無Ct值均判定為陰性樣本。
【對檢驗結果的解釋】
1. 實驗室環境污染、試劑污染、樣品交叉污染會出現假陽性結果;
2. 試劑運輸、保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,可能會導致出現假陰性結果。
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特點優勢:
1.特異性:所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。