詳細(xì)介紹
運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對照時(shí),由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專門的區(qū)域操作。本試劑盒不但準(zhǔn)確、快速、靈敏,還具有以下
產(chǎn)品名稱 | 大腸桿菌PCR檢測試劑盒 |
規(guī)格 | 50T |
分類 | PCR檢測試劑盒 |
特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單。
2. 預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 494 bp。
3. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
巖藻PEP)ELISA試劑盒
FCHO1蛋白抗體 LRRK2 ELISA Kit 亮氨酸豐富重復(fù)激酶2(LRRK2)ELISA試劑盒
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脂肪酸結(jié)合蛋白12抗體 LRRFIP1 ELISA Kit 亮氨酸豐富重復(fù)FLII相互作用蛋白1(LRRFIP1)ELISA試劑盒
四連接同源蛋白FJX1抗體 LRG1 ELISA Kit 亮氨酸豐富α2-糖蛋白1(LRG1)ELISA試劑盒
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G蛋白偶聯(lián)受體γ7抗體 SYCP3 ELISA Kit 聯(lián)會(huì)復(fù)合體蛋白3(SYCP3)ELISA試劑盒
G蛋白結(jié)合蛋白α13/Gα13抗體 GMNN ELISA Kit 聯(lián)會(huì)蛋白(GMNN)ELISA試劑盒
G蛋白結(jié)合蛋白α16/Gα16抗體 TELE ELISA Kit 連續(xù)蛋白(TELE)ELISA試劑盒
G蛋白α
Semen pruni郁李仁PCR鑒定試劑盒
Semen pruni郁李仁染料法PCR鑒定試劑盒
Semen pruni郁李仁探針法PCR鑒定試劑盒
Semen raphani萊菔子LAMP鑒定
Semen vaccariae王不留行探針法PCR鑒定試劑盒
Semen ziziphi spinosae酸棗仁LAMP鑒定試劑盒
Semen ziziphi spinosae酸棗仁PCR鑒定試劑盒
Semen ziziphi spinosae酸棗仁染料法PCR鑒定試劑盒
Semen ziziphi spinosae酸棗仁探針法PCR鑒定試劑盒
Spica prunellae夏枯草LAMP鑒定試劑盒
Spica prunellae夏枯草PCR鑒定試劑盒
大腸桿菌PCR檢測試劑盒Spica prunellae夏枯草染料法PCR鑒定試劑盒
Spica prunellae夏枯草探針法PCR鑒定試劑盒抑制劑抗體 JUP ELISA Kit 連接橋粒斑珠蛋白(JUP)ELISA試劑盒
G蛋白受體α x+z抗體 JAM3 ELISA Kit 連接附著分子3(JAM3)ELISA試劑盒
半乳糖神經(jīng)酰胺酶抗體 JAM1 ELISA Kit 連接附著分子1(JAM1)ELI
Q-PCR技術(shù):
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(real-time quantitative PCR)/QRT-PCR,是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光標(biāo)記物,利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過擴(kuò)增曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。熒光定量PCR不僅實(shí)現(xiàn)真正實(shí)現(xiàn)了定量,而且具有靈敏度和特異性、高能實(shí)現(xiàn)多重反應(yīng)、自動(dòng)化程度高、無污染、實(shí)時(shí)和準(zhǔn)確等特點(diǎn)。
熒光定量PCR所使用的熒光基團(tuán)可分為兩種:熒光探針和熒光染料。
1.使用SYBR熒光染料法來進(jìn)行熒光定量PCR時(shí),我們首先在PCR反應(yīng)體系中加入過量SYBR熒光染料。SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后發(fā)射一定量的熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
2.Taqman探針則是利用探針與模板的特異性結(jié)合的特點(diǎn),以及探針內(nèi)熒光報(bào)告基團(tuán)和淬滅基團(tuán)的分子特性來實(shí)現(xiàn)對PCR進(jìn)行定量檢測。這種方法可以實(shí)現(xiàn)高靈敏度,嚴(yán)格針對特定堿基序列的定量實(shí)驗(yàn)。