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菌種培養關鍵環節

閱讀:122          發布時間:2017-9-13

菌種培養的幾大重要環節:
1.菌種制作
液體母種的制作也有較多方法,我一般就是用小木屑加其他營養料,用錐形瓶培養。此環節比固體菌種培養要更仔細一些,特別注意細菌的監測,菌種環節一定要把握好。
2.培養液的滅菌環節
此環節要嚴格按照操作規程,把握好每一步,確保培養液滅菌*。期間注意的是,培養液不能加太滿,否則放氣的時候,液體從放氣閥沖出。個人建議在放氣閥上再安裝一個逆止閥,避免停電。
3.接種環節
接種環節也是很重要的環節,我們一般是將母種先鉤出來放到另一個裝有蒸餾水的大錐形瓶中,然后再倒入培養罐。哥哥環節必須有大火保護,否則容易感染。
4.培養環節、監測菌種純度(zui重要環節)
個人認為此環節是液體菌種培養的中心環節,也是zui重要的環節。培養菌種嚴格按照操作規程,注意每個細節。
(1)空氣過濾器和接入培養罐的硅膠管要一起提前滅菌,建議在空氣過濾器和接入培養罐的硅膠管間安裝一個逆止閥,防止培養液倒流,這是很關鍵的,否則培養時因為內外壓力差變化,培養液容易回流。
(2)監測菌種純度。這一步是至關重要的環節,此步驟將直接決定你的成敗,監測不好可能會導致全軍覆沒。監測菌種純度有以下幾種方法:
a.看:看培養液是否透明澄清,菌球是否均勻。培養液不能渾濁。用試管或錐形瓶,從下面接出少量液體(注意,一定要在大火焰的保護下進行),觀察菌球是否懸浮,不能在短時間內下沉或上浮。
b.聞:聞放氣閥處是否有菌絲的純香,不能是其他酒精味、酸味甚至惡臭,要回辨別霉菌和細菌感染時不同的氣味。
c.顯微鏡觀察:顯微鏡觀察一些霉菌的特征,平時可以將已經確定的液體菌拿來觀察練習,借助一些教材,對比觀察,這是經驗累積才能確定的,但也是*的。顯微鏡具體使用方法本論壇有介紹。
d.培養監測:這一步是zui簡單也是zui直觀的,直接反應了該菌種培養是否純凈。具體操作如下:提前做好試管或錐形瓶瓊脂培養基,并提前做好滅菌工作,再用此小錐形瓶或試管,在培養罐的下面放料處,接少量的培養液(這一步兩人操作,一個人負責火焰保護,一個人負責接液體),整個過程在火焰的保護下塞上棉塞。傾斜放置,讓部分瓊脂露出培養液。控制溫度,1-2天即可觀察,霉菌和細菌都可以盡收眼底,如果有感染,培養罐全體培養液應及時放棄,否則后果很嚴重。
3-MA;6-Amino-3-methylpurine    CAS號:    5142-23-4     質量規格:    6-氨基-3-甲基嘌呤(3MA);細胞自噬抑制劑    英文名稱:    HPLC≥97%,autophagy inhibitor        
3-Mercaptopropyl(dimethoxy)methylsilane    CAS號:    31001-77-1    質量規格:    3-巰丙基(二甲氧基)甲硅烷(>95.0%(GC))    英文名稱:    >95.0%(GC)        
3-Methoxy Desloratadine    CAS號:    165739-63-9    質量規格:    3-甲氧基地氯雷他定    英文名稱:    美國進口        
3-Methoxybenzoic acid     CAS號:    586-38-9    質量規格:    3-甲氧基苯甲酸    英文名稱:    >99%        
3-Methoxydiphenylamine    CAS號:    101-16-6    質量規格:    3-甲氧基二苯胺(>98.0%(GC))    英文名稱:    >98.0%(GC)        
3'-Methoxyphenacyl Bromide    CAS號:    5000-65-7    質量規格:    3'-甲氧基苯甲酰甲基溴(>98.0%(T))    英文名稱:    >98.0%(T)        
3'-Methoxyphenacyl Bromide    CAS號:    5000-65-7    質量規格:    3'-甲氧基苯乙酰溴(>99.0%(T))    英文名稱:    >99.0%(T)        
3-Methyl-2,4-pentanedione    CAS號:    815-57-6    質量規格:    3-甲基-2,4-戊二酮(>96.0%(T))    英文名稱:    >96.0%(T)     
菌種培養   

 

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