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酵母菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)方法與步驟
閱讀：7753 發(fā)布時(shí)間：2017-3-16| 提 供 商 | 上海一研生物科技有限公司 | 資料大小 | 3.7KB |
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| 資料類型 | JPG 圖片 | 瀏覽次數(shù) | 7753次 |
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1.實(shí)驗(yàn)材料
(1）菌種釀酒酵母（Saccharomycescerevisiae)、紅酵母菌（Rhodotorula)、啤酒酵母（Saccharomycescarlsbergensis)、假絲酵母菌（CandidaAlbicans).
(2）培養(yǎng)基及其他顯微鏡、載玻片及蓋玻片、培養(yǎng)皿、豆芽汁斜面、醋酸鈉斜面、麥芽糖培養(yǎng)基、玉米粉瓊脂培養(yǎng)基。
(3）儀器及器皿顯微鏡、培養(yǎng)皿、載玻片、蓋玻片等。
(4）染色液0.1％美藍(lán)液、中性紅染色液、芽袍染色液、碘液、蘇丹黑染液、二甲苯、0.5％番紅。
2.實(shí)驗(yàn)方法與步驟
(1)菌落特征的觀察取少量釀酒酵母、紅酵母和假絲酵母，劃線接種在麥芽糖平板上，28^-30℃培養(yǎng)3-5d。用肉眼觀察菌落特征，項(xiàng)目包括菌落表面濕潤(rùn)或干燥、有無光澤、隆起形狀、邊緣形狀、大小、顏色等。
(2)酵母菌細(xì)胞形態(tài)及芽殖方式將釀酒酵母和啤酒酵母分別接種到麥芽糖瓊脂斜面上，25℃培養(yǎng)3d。在潔凈載玻片上滴加一滴無菌水或。．1％美藍(lán)液1滴，用接種環(huán)取菌苔少許與無菌水或美藍(lán)液混勻，蓋上蓋玻片，即成為水浸片。用高倍鏡觀察酵母細(xì)胞形態(tài)及出芽情況。
在無菌培養(yǎng)皿中倒玉米粉瓊脂制平板，用新培養(yǎng)的假絲酵母以劃線法接種2條線，然后在其上面蓋以無菌蓋玻片，25^-28℃培養(yǎng)4-5d后觀察，觀察在劃線兩側(cè)是否形成假菌絲。
(3)子囊袍子的觀察將釀酒酵母接種于豆芽汁或麥芽汁液體培養(yǎng)基中，28-30℃培養(yǎng)24h，如此連續(xù)傳代3-4次，使其生長(zhǎng)良好。然后轉(zhuǎn)接到醋酸鈉斜面培養(yǎng)基上，25-28℃培養(yǎng)4-5d。用水浸片或涂片后再用芽孢染色法染色，觀察子囊孢子形狀及每個(gè)子囊內(nèi)的子囊孢子數(shù)目。
(4)液泡的活體染色觀察在潔凈的載玻片上滴加一滴中性紅染色液，用接種環(huán)取少量釀酒酵母與染液混勻，染色4^-5min后，蓋上蓋玻片在顯微鏡下觀察。中性紅是液泡的活體染色劑，當(dāng)細(xì)胞處于生活狀態(tài)時(shí)，液泡被染成紅色，細(xì)胞質(zhì)及核不著色；若細(xì)胞死亡，液泡染色消失，細(xì)胞質(zhì)及核呈現(xiàn)彌散性紅色。