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小鼠葉酸受體elisa檢測(cè)試劑盒常見組成部分
閱讀:129 發(fā)布時(shí)間:2023-9-27小鼠葉酸受體elisa檢測(cè)試劑盒常見組成部分:
1)小鼠葉酸受體elisa檢測(cè)試劑盒圖片酶和底物:在ELISA中zui常用的酶為HRP和ALP。
2)抗體:在ELISA中應(yīng)用的抗體可分為多克隆抗體(多抗)和單克隆抗體(單抗)。
3)抗原:在ELISA中應(yīng)用的抗原要求有較高的特異性、親和力和純度。主要有三類,即自然抗原、人工合成抗原和基因重組抗原。
4 人E選擇素(E-Selectin/CD62E)檢測(cè)試劑盒包被:將免疫活性物質(zhì)(抗原或抗體)結(jié)合于固相載體上的過(guò)程稱為包被。常用的材料有聚苯乙烯、硝酸纖維薄膜等;常用的方法有吸附法、化學(xué)交聯(lián)法及親和素-生物素間接包被法
5)固相載體:固相載體是ELISA中用以分離結(jié)合標(biāo)記物和游離標(biāo)記物的主要手段,應(yīng)與各種免疫活性物質(zhì)有良好的結(jié)合性能并且不改變其免疫活性。常用的固相載體有聚苯乙烯塑料和硝酸纖維素膜。
試劑配制
1、 標(biāo)準(zhǔn)品
(1) 從試劑盒中取出一支標(biāo)準(zhǔn)品,于6000-10000rpm 離心30 秒。用1ml 樣本稀釋液溶解,并用吸頭對(duì)準(zhǔn)凍存管底部反復(fù)吸打5 次以助溶解,充分混勻得到標(biāo)準(zhǔn)品S7,放置備用。
(2) 取7 個(gè)1.5 ml 離心管(S0-S6)依次排列,各加入250μl 樣本稀釋液。吸取250μl 標(biāo)準(zhǔn)品S7 到*個(gè)離心管中(S6),輕輕吹打混勻。從S6 中吸取250μl 到第二個(gè)EP 管中(S5),輕輕吹打混勻。以此類推進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)品的倍比稀釋。S0 為樣本稀釋液。
2、 洗液工作液濃洗滌液按1:25倍用去離子水進(jìn)行稀釋。例如用量筒量取240ml去離子水,倒入燒杯或其他潔凈容器中,再量取10ml濃洗滌液,均勻加入,攪拌混勻,在臨用前配妥。濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
3、 生物素標(biāo)記抗體工作液生物素標(biāo)記抗體液按1:100倍用生物素標(biāo)記抗體稀釋液進(jìn)行稀釋。如10μl生物素標(biāo)記抗體加990μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液,輕輕混勻,在臨用10分鐘內(nèi)配妥。
4、 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素按1:100倍用辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液進(jìn)行稀釋。如10μl辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素加990μl辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液,輕輕混勻,在臨用10分鐘內(nèi)配妥。