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技術文章

ANG-4 小鼠血管生成素4ELISA檢測試劑盒操作步驟

閱讀:149          發布時間:2023-5-9

ANG-4 小鼠血管生成素4ELISA檢測試劑盒操作步驟


1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘。

AMPK beta 2英文名稱:腺苷單磷酸活化蛋白激酶β2抗體

phospho-APC1 (Ser355)英文名稱:磷酸化細胞周期末期促進復合蛋白APC1抗體

ANAPC1英文名稱:細胞周期末期促進復合蛋白APC1抗體

phospho-AKT2 (Ser474)英文名稱:磷酸化蛋白激酶B2抗體

phospho-APBB1 (Ser175)英文名稱:磷酸化鐵蛋白Fe65抗體

phospho-APBB1 (Ser347)英文名稱:磷酸化鐵蛋白Fe65抗體

phospho-Amyloid Precursor Protein (Thr743)英文名稱:磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體

phospho-Amyloid Precursor Protein (Ser730)英文名稱:磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體

phospho-ATF2 (Ser322)英文名稱:磷酸化活化復制因子2抗體

phospho-ATF2 (Thr51)英文名稱:磷酸化活化復制因子2抗體

phospho-APC1 (Ser377)英文名稱:磷酸化細胞周期末期促進復合蛋白APC1抗體

ASAP1英文名稱:發育分化增強因子1抗體

phospho-ASAP1 (Tyr782)英文名稱:磷酸化發育分化增強因子1抗體

AKT3英文名稱:蛋白激酶B3

Girdin英文名稱:肌動蛋白結合蛋白Girdin抗體

AKAP2英文名稱:蛋白激酶A2抗體

AT2R2英文名稱:血管緊張素Ⅱ受體2抗體

ASH1L英文名稱:ASH1蛋白抗體


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