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如何測定大鼠elisa試劑盒操作?
閱讀:238 發布時間:2018-9-11 大鼠elisa試劑盒測定現一般為采用手工操作的以微孔板條為固相的測定形式,測定操作十分簡略,一般涉及到標本的搜集保留、試劑預備、加樣、溫育、洗板、顯色、比色、成果判別和成果陳述及解釋等方面,其間任一過程的不妥都會影響測定成果,且尤以加樣、溫育和洗板等過程為甚。
ELISA試劑盒要思考以下幾個方面:
(1)要留意防止呈現嚴峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有相似過氧化物的活性,因而,在以HRP為符號酶的人ELISA試劑盒測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很簡單在溫育過程中吸附于固相,然后與后邊參加的HRP底物反響顯色。
(2)樣本的收集及血清別離中要留意盡量防止細菌污染,一則細菌的生長,其所排泄的一些酶也許會對抗原抗體等蛋白發生分化效果;二則一些細菌的內源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶自身會對用相應酶作符號的測定辦法發生非特異性干擾。
(3)血清標本如是以無菌操作別離,則可以在2~8℃下保留一星期,如為有菌操作,則主張冰凍保留。樣本的長時刻保留,應在-70℃以下。
(4)冰凍保留的血清標本須留意防止因停電等形成的重復凍融。標本的重復凍融所發生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子發生破壞效果,然后引起假陰性成果。此外,凍融標本的混勻亦應留意,不要進行劇烈振蕩,重復倒置混勻即可。
(5)標本在保留中如呈現細菌污染所造成的的混濁或絮狀物時,應離心沉積后取上清檢查。