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ATCC菌種的分離與育種的標準
閱讀:312 發布時間:2018-7-24 ATCC菌種的分離有組織分離、孢子分離及基質內菌絲分離三種方法。基質內菌絲分離因易污染較少采用。孢子分離法多在研究及菌株復壯時采用。規模時采用的是子實體菌絲分離法,該法操作簡便,且能保持原有菌株的優良品性。
(一)孢子分離法
取發育正常、健壯、已開始彈射孢子的靈芝子實體。切除菌柄,無菌條件下用75%酒精進行表面消毒,用無菌水多次沖洗,再用無菌棉擦拭干凈。將菌管朝下放在經滅菌的培養皿內,外罩以用75%酒精擦拭過的玻璃罩,在25~30℃條件下經過5~6小時后孢子散落在培養皿底部,用接種針挑取少量孢子放入試管斜面培養基中部,移至培養箱中進行培養。分離用的培養基可采用普通馬鈴薯培養基、麩皮提取液培養基等。
孢子分離法污染率較高,應及時檢查挑棄被雜菌污染的試管。待孢子萌發出菌絲時,應連同少量培養基挑出及時移管。
可將子實體切成蠶豆大的種塊,用無菌鐵鉤固定后置三角瓶中,瓶底有1cm后培養基,塞上棉塞。見孢子彈射后并萌發出菌絲時及時移管。
野外分離靈芝孢子時因條件限制,可將菌肉(帶菌管)貼在試管壁上,待孢子彈射入培養基后及時轉管。
孢子萌發后先形成一級菌絲,幾天后便可形成二級菌絲。如果在顯微鏡下觀察到鎖狀聯合,一般即可確定為得到了靈芝菌絲。
(二)基質內菌絲分離法
這是利用靈芝生長的基質作為分離材料獲得靈芝菌種的一種方法。其優點是在靈芝子實體已衰老時仍可以獲得靈芝純菌絲體。但是,在子實體生長時,基質內的靈芝菌絲體不是單獨存在的,往往和細菌、放射菌、霉菌及其他真菌生長在一起。為獲得純靈芝菌絲體,分離時注意分離材料的選擇,選靈芝菌絲生長好,菇木尚未腐爛的作為分離材料。ATCC菌種分離時接種塊盡可能小些,所分離的菌種要經出菇試驗確認是優良菌株才可在上使用。
Phospho-MARCKS (Ser152/156) 毒蕈堿型乙酰膽堿受體M1抗體
Phospho-Mcl1 (Ser159/Thr163) 丁酰膽堿酯酶抗體(N端)
phospho-M-CSF Receptor(Tyr546) 丁酰膽堿酯酶抗體(C端)
phospho-M-CSF Receptor(Tyr708) 丁酰膽堿酯酶單克隆抗體
phospho-M-CSF Receptor(Tyr809) 調亡誘導因子抗體
Phospho-MDM2 (Ser166) 調亡誘導因子抗體
Phospho-MEF2A (Ser408) 調節染色體組裝激酶1抗體
Phospho-MEF2A (Thr312) 凋亡抑制因子5抗體
ATCC菌種