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微生物菌種活化方式五花八門
閱讀:526 發(fā)布時間:2018-4-26微生物菌種活化就是將菌種保藏中心處于保藏狀態(tài)的菌種放入適宜的培養(yǎng)基中培養(yǎng),逐級擴大培養(yǎng)是為了得到純而壯的培養(yǎng)物,即獲得活力旺盛的、接種數(shù)量足夠的培養(yǎng)物。菌種發(fā)酵有一般需要2-3代的復(fù)壯過程,因為保存時的條件往往和培養(yǎng)時的條件不相同,所以要活化,讓菌種逐漸適應(yīng)培養(yǎng)環(huán)境要明白菌種活化的情況就需要了解菌種保藏的方式和方法。目前國內(nèi)常用的菌種保存方法包括:定期移植法、液體石蠟法、沙土管法、真空冷凍干燥法、80℃冰箱凍結(jié)法、液氮超低溫凍結(jié)法。對于不同的保存方式活化的方式也不同:
1、定期移植法的菌種復(fù)蘇較簡單,直接轉(zhuǎn)接即可;
2、液體石蠟法保存的菌種在復(fù)蘇時,挑取少量菌體轉(zhuǎn)接在適宜的新鮮培養(yǎng)基上,生長繁殖后,再重新轉(zhuǎn)接一次;
3、沙土管法保存菌種在復(fù)蘇時,在無菌條件下打開沙土管,取部分沙土粒于適宜的斜面培養(yǎng)基上,長出菌落后再轉(zhuǎn)接一次。或取沙土粒于適宜的液體培養(yǎng)基中,增殖培養(yǎng)后再轉(zhuǎn)接斜面;
4、真空冷凍干燥法保存菌種在復(fù)蘇時先用70%酒精棉花擦拭安瓿上部,將安瓿管頂部燒熱,用無菌棉簽沾冷水,在頂部擦一圈,頂部出現(xiàn)裂紋,用挫刀或鑷子頸部輕叩一下,敲下已開裂的安瓿管的頂端,用無菌水或培養(yǎng)液溶解菌塊,使用無菌吸管移入新鮮培養(yǎng)基上,進行適溫培養(yǎng);
5、-80℃冰箱凍結(jié)法保存菌種復(fù)蘇時,從冰箱中取出安瓿管或塑料凍存管,應(yīng)立即放置38℃-40℃水浴中快速復(fù)蘇并適當(dāng)快速搖動。直到內(nèi)部結(jié)冰全部溶解為止,約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管,將內(nèi)容物移至適宜的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)
6、液氮超低溫凍結(jié)法保存菌種復(fù)蘇與-80℃冰箱凍結(jié)法保存菌種復(fù)蘇相似,從液氮罐中取出安瓿管或塑料凍存管,應(yīng)立即放置在38℃-40℃水浴中快速復(fù)蘇并適當(dāng)搖動。直到微生物菌種內(nèi)部結(jié)冰全部溶解為止,一般約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管,將內(nèi)容物移至適宜的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。
腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子/上皮鋅指蛋白KIgG 小鼠γ干擾素(IFN-γ)
腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子13IgG 小鼠γ氨基丁酸(GABA)
腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子5IgG 小鼠β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)
腸道肽轉(zhuǎn)運蛋白1/小肽轉(zhuǎn)運蛋白1IgG 小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)
腸道肽轉(zhuǎn)運蛋白2/小肽轉(zhuǎn)運蛋白2IgG 小鼠β萘酚(β-Nph)
腸上皮干細胞蛋白IgG 小鼠β內(nèi)酰胺酶抑制劑(BLI)
超氧化物歧化酶1IgG 小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)
超氧化物歧化酶3IgG 小鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)
超氧化物歧化酶4IgG 小鼠β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)
巢蛋白/神經(jīng)上皮干細胞蛋白IgG 小鼠β甘露糖苷酶(β Manase)
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