詳細介紹
公司細胞庫細胞株種類齊全:大鼠腹水癌細胞、腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人宮頸癌細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內膜細胞等。細胞狀態良好,飽滿,光澤度好,*,專業技術指導,另有細胞培養類產品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養基、細胞培養瓶等產品。歡迎廣大科研用戶!
細胞名稱 Cas9穩定表達的人肺癌細胞;A549-Cas9-538培養
形態特性 上皮樣;多角形
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使A549細胞穩定表達Cas9-Flag-Neo,經400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。
培養條件 McCoy's 5A Media (Modified with Tricine) 10%FBS;400ug/ml G418
傳代方法 1:3~1:8傳代;每周2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,12;D12S391:18,19;D13S317:11,11;D16S539:11,12;D18S51:14,17;D19S433:29,29;D21S11:29,29;D2S1338:24,24;D3S1358:16,16;D5S818:11,11;D6S1043:11,13;D7S820:8,11;D8S1179:13,14;FGA:23,23;Penta E:7,11;TH01:8,9.3;TPOX:8,11;vWA:14,14;
同工酶
染色體
使用權限 A類
Cas9穩定表達的人肺癌細胞;A549-Cas9-538培養復蘇操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
Cas9穩定表達的人肺癌細胞;A549-Cas9-538培養注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養箱內靜置培養,隔天再取出觀察。此時多數細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養;如果染色結果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認后我們為您再免費寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用,細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養基混合,使細胞逐漸適應培養條件。
5. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和公司技術部溝通交流。
6. 該細胞只能用于科研,不得用于臨床應用。
進口、國產 英文名稱: L-天門冬氨酸鈉鹽 L-Aspartic acid sodium sal 含量: BR,98%
進口、國產 英文名稱: L-天冬氨酸鉀 Potassium L-Aspartate 含量: BR,98%
進口、國產 英文名稱: L-天門冬氨酸鎂 L-Aspartic acid Mg salt 含量: BR,98%
進口、國產 英文名稱: D-天門冬氨酸 D-Aspartic acid 含量: BR,99%
進口、國產 英文名稱: DL-天門冬氨酸 DL-Aspartic acid 含量: BR,99%
進口、國產 英文名稱: L-天冬素 L-Asparagine 含量: BR,99%
進口、國產 英文名稱: L-天冬素一水 L-Asparagine Monohydrate 含量: BR,99%
進口、國產 英文名稱: DL-天冬素 DL- Asparaning H2O 含量: BR,99%