詳細介紹
公司細胞庫細胞株種類齊全:大鼠腹水癌細胞、腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人宮頸癌細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內膜細胞等。細胞狀態良好,飽滿,光澤度好,*,專業技術指導,另有細胞培養類產品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養基、細胞培養瓶等產品。歡迎廣大科研用戶!
細胞名稱 Cas9穩定表達的人胰腺癌細胞;PANC-1-Cas9-558培養
形態特性 上皮樣;多角形
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使PANC-1細胞穩定表達Cas9-Flag-Neo,經400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;400ug/ml G418
傳代方法 1:2~1:4傳代;每周2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:10,12;D12S391:22,22;D13S317:11,11;D16S539:11,11;D18S51:12,12;D19S433:11,16;D21S11:28,28;D2S1338:23,24;D3S1358:17,17;D5S818:11,13;D6S1043:11,12;D7S820:8,10;D8S1179:14,15;FGA:21,21;;Penta E:7,14;TH01:7,8;TPOX:8,11;vWA:15,15;
同工酶
染色體
使用權限 A類
Cas9穩定表達的人胰腺癌細胞;PANC-1-Cas9-558培養復蘇操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
Cas9穩定表達的人胰腺癌細胞;PANC-1-Cas9-558培養注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養箱內靜置培養,隔天再取出觀察。此時多數細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養;如果染色結果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認后我們為您再免費寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用,細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養基混合,使細胞逐漸適應培養條件。
5. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和公司技術部溝通交流。
6. 該細胞只能用于科研,不得用于臨床應用。
4'-Aminobenzo-15-crown 5-Ether CAS號: 60835-71-4 質量規格: 4'-氨基苯并-15-冠5-醚(>97.0%(GC)(T)) 英文名稱: >97.0%(GC)(T)
4-Aminobenzonitrile CAS號: 873-74-5 質量規格: 4-氨基苯腈(>98.0%(GC)(T)) 英文名稱: >98.0%(GC)(T)
4-Aminobutyric acid CAS號: 56-12-2 質量規格: γ-氨基丁酸(GABA) 英文名稱: >98%
4-Aminocyclohexanecarboxylic Acid (cis- and trans- mixture) CAS號: 1776-53-0 質量規格: 4-氨基環己甲酸(順反異構體混合物)(>95.0%(GC)(T)) 英文名稱: >95.0%(GC)(T)
4-Aminophthalonitrile CAS號: 56765-79-8 質量規格: 4-氨基鄰苯二甲腈(>98.0%(N)) 英文名稱: >98.0%(N)
4-Amino-p-terphenyl CAS號: 7293-45-0 質量規格: 4-氨基對三聯苯(>97.0%(GC)) 英文名稱: >97.0%(GC)
4-Aminostyrene (stabilized with HQ) CAS號: 1520-21-4 質量規格: 4-氨基苯乙烯(含穩定劑氫醌)(>95.0%(T)) 英文名稱: >95.0%(T)