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詳細介紹
產品屬性：
中文名稱：MTS細胞增殖與細胞毒性檢測試劑盒
英文名稱：MTS Cell Proliferation And Cytotoxicity Detection Kit
產品規格：500次
發貨周期：1～3天
商品介紹：
| MTS是一種新型甲臜化合物，和MTT同屬四唑氮衍生物。MTS能被活細胞里的線粒體脫氫酶降解而產生棕黃色水溶性的甲臜，通過測定甲臜的光譜吸收，進而可以測定細胞的增殖情況。 產品特點： 1．本試劑盒是單溶液式細胞增殖與細胞毒性檢測試劑，主要成分包含MTS和一個電子耦合試劑，溶液的穩定性強，反應的靈敏度高。 2．操作簡便、快捷。可直接加入到檢測平板。在96-孔板中檢測時，無需洗滌或收獲細胞，免去溶解步驟。 3．無放射性。不需要配制液閃混合物，也不需要處理廢棄物。 4．與MTT相比，使用更安全。不需要使用揮發性的有機溶劑來溶解甲臜產物。 5．操作靈活，與MTT不同，平板讀數后可放回溫箱繼續孵育，使顏色進一步生成。 儲存條件：低溫運輸，-20℃避光保存，有效期半年。 使用效果： 96孔板中加入細胞100μL/孔(約1×104)，37℃，5% CO2細胞培養箱培養24小時，加入適當濃度的受試化合物。培養箱中孵育適當時間，每孔中加入10μL的MTS細胞增殖及毒性檢測溶液。37℃孵育1-4小時。490nm波長檢測光密度。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調控；
⑤細胞分化及其調控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
ADCK1蛋白抗體
酰基合結構域蛋白4抗體
α/β水解酶4抗體
ADCK2蛋白抗體
乙醛脫氫酶16家庭A1抗體
粘附分子IgG樣結構域蛋白3抗體
乙醇脫氫酶1抗體
δ氨基乙酰丙酸脫水酶抗體
肌索硬化癥相關蛋白4抗體
α2巨球蛋白抗體
ACCSL蛋白抗體
甲胎蛋白抗體
β淀粉樣前體蛋白結合蛋白3抗體
星形肌動蛋白抗體
系統性紅斑狼瘡相關蛋白TREX1抗體
磷酸化系統性紅斑狼瘡先關蛋白TREX1抗體
磷酸化系統性紅斑狼瘡相關蛋白TREX1抗體
接頭相關蛋白復合體AP-2μ鏈1抗體
磷酸化接頭相關蛋白復合體AP-2μ鏈1抗體
膜粘連蛋白7抗體
3號染色體開放閱讀框15抗體
載脂蛋白B受體抗體
三磷酸腺苷結合盒轉運蛋白2抗體
10X Taq Buffer with KCl 4x1.25 ml
10X Reaction Buffer with MgCl2 for DNase I 1 ml
50X TAE Buffer (Tris-acetate-EDTA) 1 l
10X TBE Buffer (Tris-borate-EDTA) 1 l
10X Taq Buffer without Detergent 4x1.25 ml
10X Buffer BamHI, Lsp1109I 5x1 ml
10X Buffer BfuI 1 ml
10X Reaction Buffer for phi29 DNA Polymerase 5x1 ml
10X DreamTaq™ Buffer 4x1.25 ml
10X T4 DNA Ligase Buffer 1.5 ml
10X DreamTaq™ Green Buffer 4x1.25 ml
10X Buffer B 5x1 ml
10X Buffer G 5x1 ml
10X Buffer O 5x1 ml
10X Buffer R 5x1 ml
10X Buffer Tango™ 5x1 ml
Pyrophosphatase, Inorganic 10 units
FastAP™ Thermosensitive Alkaline Phosphatase 1000 units
FastAP™ Thermosensitive Alkaline Phosphatase 5x1000 units
FastAP™ Thermosensitive Alkaline Phosphatase 300 units
T4 Polynucleotide Kinase 500 units
T4 Polynucleotide Kinase 2500 units
T4 DNA Ligase 1000 units
T4 DNA Ligase 5x1000 units
T4 DNA Ligase, HC 5000 units
T4 DNA Ligase 200 units
MTS細胞增殖與細胞毒性檢測試劑盒 DNA Ligase, LC 2x500 units
T4 RNA Ligase 1000 units
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
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