詳細介紹
熒光定量PCR試劑盒:
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進行Real Time PCR擴增反應的全新預混系統,能大幅度提高產物特異性和反應靈敏度。同時,提供ROX作為內參染料。該試劑盒的熒光強度為同類產品的3-5倍,能更靈敏的、更直觀的反應目的模板DNA的濃度。
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動Foregene Taq DNAPolymerase,該酶相對于普通Taq酶具有擴增效率高、特異性擴增能力強、錯配率低等優點。用于熒光定量PCR反應可減少非特異性擴增,提高PCR的準確性。
中文名稱:腺病毒F型探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Adenovirus(AV)
貨號:GOY-M3640
規格:50T
產品特性: 高特異性:本產品采用熱啟動 DNA 聚合酶,90℃以上 2min 后具有擴增活性,可大大提高 PCR 產物的特 異性。 靈敏度:本產品包含的優化的緩沖液可檢測低拷貝數的模板,且重復性好。 高適用性:本產品可適用于任意熒光定量 PCR 儀。
試劑盒內容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR:包括特別改造的熱啟動 Taq DNAPolymerase、MgCl2、優化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I、反應緩沖液、PCR反應增強劑、優化劑以及穩定劑等。PCR 反應時,只需將適當的裂解混合液、引物、DNase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應。
ROX Reference Dye:一般用于 ABI、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴增儀上,用于調整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同,用戶可以根據儀器的推薦濃度添加。DNase-Free ddH2O:超純水,用于 PCR 反應。
試劑盒應用
熒光定量PCR進行模板定量分析。
常規PCR擴增。
樣品要求及注意事項:
1、 如果提供實驗材料,實驗材料必須保證新鮮,請您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩定劑,并用干冰運輸。
2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,動植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,貼壁細胞:10cm2/mlTrigol,懸浮細胞:5×106動植物,酵母細胞或細菌細胞10×107/mlTrigol。
3、 如果提供RNA或cDNA我們要對您提供的材料進行評估。
4、 實時熒光定量PCR服務您一定要提供樣品及要擴增基因的詳細信息。
熒光定量PCR原理:
熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現其定量功能的。其原理:隨著PCR反應的進行,PCR反應產物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經過一個循環,收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監測產物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產物量的變化。而在平臺期,擴增產物已不再呈指數級的增加,PCR 的終產物量與起始模板量之間沒有線性關系,根據終的 PCR 產物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數。只有在熒光信號指數擴增階段, PCR產物量的對數值與起始模板量之間存在線性關系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
以下是公司正在熱銷的產品:
腦靜脈血管平滑肌細胞465-16-7腺病IgG檢測試劑盒
腦膜細胞465-21-4腺病36抗體檢測試劑盒
神經元細胞465-39-4腺病3檢測試劑盒
神經少突起前質膠質細胞465-99-6線粒體肽蛋氨酸亞砜還原酶檢測試劑盒
神經星形膠質細胞466-24-0線粒體呼吸鏈復合物I ELISA試劑盒
神經小膠質細胞466-26-2酰基化饑餓素檢測試劑盒
腦微血管內皮細胞4670-05-7纖維母細胞生長因子受體1癌基因伴侶檢測試劑盒
腦成纖維細胞467-55-0纖維介素蛋白檢測試劑盒
原代上皮細胞特制無血清添加劑470-17-7纖維膠凝蛋白3檢測試劑盒
原代內皮細胞特制無血清添加劑470-37-1纖維蛋白原降解產物檢測試劑盒
原代平滑肌細胞特制無血清添加劑470-82-6纖維蛋白原α鏈檢測試劑盒
原代成纖維細胞特制無血清添加劑471-53-4纖維蛋白原檢測試劑盒
原代心肌細胞特制無血清添加劑471-66-9纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物檢測試劑盒兔血漿Resorufin, sodium salt 大鼠腫瘤壞死因子誘導蛋白6(TSG-6)ELISA Kit
DNA酶瓊脂Rhodamine 110 大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體受體4(TRAIL-R4)ELISA Kit
7.5%化鈉肉湯Rhodamine 700 大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體受體3(TRAIL-R3)ELISA Kit
腸素產培養基Rhodamine 800大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體受體1(TRAIL-R1)ELISA Kit
腺病毒F型探針法熒光定量PCR試劑盒亞碲酸鹽肉湯培養基基礎Rhodamine B 大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(TRAIL)ELISA Kit
葡萄球菌增菌肉湯Rhodamine 6G 大鼠腫瘤壞死因子受體超家族成員11A(TNFRSF11A/RANK)ELISA Kit
苯胺藍-DNA酶瓊脂Sulforhodamine 101 大鼠腫瘤壞死因子γ(TNF-γ)ELISA Kit
堿性蛋白胨水Sulforhodamine B 大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA Kit
TCBS瓊脂Sulforhodamine G 大鼠腫瘤壞死因子(配體)超家族成員14(TNFSF14)ELISA Kit
化鈉多粘菌素B肉湯基礎(SCPB)β-Trifluoromethylumbelliferone [7-Hydroxy-4-trifluoromethylcoumarin] 大鼠中性粒細胞趨化因子(CINC)ELISA Kit
多粘菌素B(2.5萬單位)HPTS [8-Hydroxypyrene-1,3,6-trisulfonic acid, trisodium salt] 大鼠質膜鈣ATP酶(PMCA)ELISA Kit
慶大霉素瓊脂Cresyl violet 大鼠脂氧素A4(LXA4)ELISA Kit
我妻氏培養基基礎5(6)-FAM cadaverine [Fluorescein-5(6)-carboxamide cadaverine] 大鼠脂肪酸結合蛋白4,脂肪細胞型(FABP4)ELISA Kit
相對定量簡介:
分析方法: ①雙標曲法 ②2 - △Ct ③2 - △△Ct ④Pfaffi法
①雙標準曲線法簡介
公式:
優點:分析簡單,實驗優化簡單
缺點:對每一個基因,每一輪實驗都必需做標準曲線;必需有固定的標準品做標準曲線;這些標準品并不代表樣品擴增的真實狀態應用:基因表達調控研究中用與*的兩種相對定量方法之一。