詳細介紹
中文名稱:水牛正痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Buffalo Pox Virus(BPXV)
貨號:GOY-M3772
規(guī)格:50T
相對定量簡介:
分析方法: ①雙標曲法 ②2 - △Ct ③2 - △△Ct ④Pfaffi法
①雙標準曲線法簡介
公式:
優(yōu)點:分析簡單,實驗優(yōu)化簡單
缺點:對每一個基因,每一輪實驗都必需做標準曲線;必需有固定的標準品做標準曲線;這些標準品并不代表樣品擴增的真實狀態(tài)應用:基因表達調(diào)控研究中用與*的兩種相對定量方法之一
熒光定量PCR試劑盒:
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進行Real Time PCR擴增反應的全新預混系統(tǒng),能大幅度提高產(chǎn)物特異性和反應靈敏度。同時,提供ROX作為內(nèi)參染料。該試劑盒的熒光強度為同類產(chǎn)品的3-5倍,能更靈敏的、更直觀的反應目的模板DNA的濃度。
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動Foregene Taq DNAPolymerase,該酶相對于普通Taq酶具有擴增效率高、特異性擴增能力強、錯配率低等優(yōu)點。用于熒光定量PCR反應可減少非特異性擴增,提高PCR的準確性。
試劑盒內(nèi)容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR:包括特別改造的熱啟動 Taq DNAPolymerase、MgCl2、優(yōu)化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I、反應緩沖液、PCR反應增強劑、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等。PCR 反應時,只需將適當?shù)牧呀饣旌弦骸⒁铩Nase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應。
ROX Reference Dye:一般用于 ABI、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴增儀上,用于調(diào)整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同,用戶可以根據(jù)儀器的推薦濃度添加。DNase-Free ddH2O:超純水,用于 PCR 反應。
試劑盒應用
熒光定量PCR進行模板定量分析。
常規(guī)PCR擴增。
樣品要求及注意事項:
1、 如果提供實驗材料,實驗材料必須保證新鮮,請您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑,并用干冰運輸。
2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,動植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,貼壁細胞:10cm2/mlTrigol,懸浮細胞:5×106動植物,酵母細胞或細菌細胞10×107/mlTrigol。
3、 如果提供RNA或cDNA我們要對您提供的材料進行評估。
4、 實時熒光定量PCR服務您一定要提供樣品及要擴增基因的詳細信息。
熒光定量PCR原理:
熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應的進行,PCR反應產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
崩潰酶305-01-1αL巖藻糖苷酶檢測試劑盒
黃嘌呤氧化酶525-21-3αL艾杜糖苷酸酶檢測試劑盒
過氧化物歧化酶574-84-5α2抗纖溶酶檢測試劑盒
凝血活素531-75-9α2巨球蛋白檢測試劑盒
Taq DNA聚合酶524-30-1α2-HS糖蛋白檢測試劑盒
Hot Taq DNA聚合酶439-89-4α1微球蛋白/bikunin前體檢測試劑盒
Hotstart Taq DNA聚合酶120926-46-7α1酸性糖蛋白檢測試劑盒
Taq plus DNA聚合酶62268-42-2α1抗胰糜蛋白酶檢測試劑盒
Pfu DNA聚合酶29741-09-1α1抗胰蛋白酶檢測試劑盒
SP6核糖核酸聚合酶578-74-5α1防御素檢測試劑盒
T3 RNA聚合酶174284-20-9α1β糖蛋白檢測試劑盒
T7 RNA聚合酶59914-91-9α/β干擾素受體檢測試劑盒
T4 DNA聚合酶520-36-5Z-DNA結合蛋白1檢測試劑盒周期素B1抗水牛正痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒原 1-(2,6-二苯基)羥吲哚
4-Chlorophenoxyacetic acid sodium saltMonkey PPARγC1α (Peroxisome Proliferator Activated Receptor Gamma Coactivator 1 Alpha) ELISA Kit
周期素D2抗原 順鉑
4-Chloromercuribenzoic acidMonkey APC (Activated Protein C) ELISA Kit
周期素D3抗原 2--4氨基吡啶
4-BromochlorobenzeneMonkey GAL (Galanin) ELISA Kit
細胞色素P450 3A4抗原 前胡香豆素E
4-BromobiphenylMonkey ANG I R-Ab (Angiotensin I Receptor Antibody) ELISA Kit
富半胱氨酸肝素結合蛋白61抗原 磺酸達氟沙星
4-Bromobenzoic acidMonkey FLNC (Filamin C, Gamma) ELISA Kit
人巨細胞病UL23抗原 鹽酸沙拉沙星
4-Biphenylacetic acidMonkey PCK1 (Phosphoenolpyruvate Carboxykinase 1) ELISA Kit
產(chǎn)品特性: 高特異性:本產(chǎn)品采用熱啟動 DNA 聚合酶,90℃以上 2min 后具有擴增活性,可大大提高 PCR 產(chǎn)物的特 異性。 靈敏度:本產(chǎn)品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測低拷貝數(shù)的模板,且重復性好。 高適用性:本產(chǎn)品可適用于任意熒光定量 PCR 儀。