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詳細介紹
商品介紹：
AO/EB雙染細胞凋亡檢測試劑盒是采用DNA探針雙染細胞核的方法檢測細胞的狀態。橙(AO)具有膜通透性，能透過細胞膜，使核DNA和RNA染色。其激發波長為488nm，吸收波長為515nm。它與細胞中DNA和RNA 結合量存在差別，復合物可發出不同顏色的熒光,紅色熒光為AO-DNA(F>600nm),綠色熒光為AO-RNA或單鏈DNA(F>530nm)。因此，在熒光顯微鏡下觀察，橙可透過正常細胞膜，使細胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光；而在凋亡細胞中，因染色質固縮或斷裂為大小不等的片斷，形成凋亡小體。橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光，或黃綠色碎片顆粒；而壞死細胞黃熒光減弱甚至消失。橙AO 常與溴化乙啶EB 合用雙染，因EB 只染死細胞使之產生桔黃色熒光，由此可區分出正常細胞、凋亡細胞及壞死細胞。 儲存條件：A液和B液-20℃避光保存。C液2-8℃保存。 有效期：一年。 |
產品屬性：
中文名稱：AO/EB雙染試劑盒
英文名稱：
產品規格：100T
發貨周期：1～3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調控；
⑤細胞分化及其調控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
托瑞米芬英文名稱： Cyclosporine A磷化原癌基因c-kit抗體包裝5g
拓撲替康鹽鹽英文名稱： Ticlopidine HCl磷化原癌基因c-kit抗體包裝5g
維酰酚英文名稱： Ticlopidine HCl胸腺基質淋巴生成受體抗體包裝25g
維羅非尼,RG7204英文名稱： Cytarabine磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝5g
戊柔比星英文名稱： Cytarabine磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝1g
西地尼布;AZD2171英文名稱： Cytarabine蛋白磷激PKC/CPI-17抗體包裝5g
西地尼布馬來鹽英文名稱： Dacarbazine磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝1g
亞葉鈣英文名稱： Dacarbazine磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝1g
鹽阿糖胞苷英文名稱： Dasatinib胰輔脂抗體包裝5g
鹽埃羅替尼英文名稱： Dasatinib19號染色體開放閱讀框45抗體包裝5MG
鹽昂丹司瓊英文名稱： Daptomycin過氧化氫誘導轉錄蛋白1抗體包裝5MG
鹽達莫司汀英文名稱： Daptomycin核因子NFκB激活蛋白1抗體包裝100g
鹽表阿霉英文名稱： Daunorubicin HCl第12號染色體開放閱讀框23抗體包裝25g
鹽多柔比星/鹽阿霉英文名稱： Daunorubicin HClγ-連環/連接蛋白γ抗體包裝5g
鹽米托蒽醌英文名稱： Daunorubicin HCl10號染色體開放閱讀框4抗體包裝100g
鏈霉菌屬Streptomyces│sp. 質量規格：含量測定胰島受體底物2試劑盒鹽拓撲替康;Topotecan hyd
膠孢Glomerella│cingulata (Stoneman) Spauld. & H. Schrenk 質量規格：>99.0%胰島受體底物1試劑盒延齡草苷;Diosgenin gluco
小珊瑚球菌Corallococcus│exiguus 質量規格：HPLC>99.0%,標準品胰島受體β試劑盒異槲皮;Isoquercitrin
AO/EB雙染試劑盒山羊葡萄球 新生牛血清500ml/XQ-A0500磷酸化信號轉導分子SMAD-2Elisa
克魯斯假絲酵母 新生牛血清100ml/XQ-A0100磷酸化信號轉導分子SMAD-7Elisa
泡盛曲霉 新生牛血清50ml/XQ-A0050核糖基轉移1Elisa
薄層 穩定劑，500ml裝/CT-0500脂聯β樣1Elisa
釀酒酵母 穩定劑，200ml裝/CT-0200胰島抗體Elisa
穩定劑，50ml裝/CT-0050神經調節蛋白4Elisa
仙芝(靈芝屬之一種) 穩定劑，10ml裝/CT-0010血管緊張轉化1Elisa
香菇 蛋白/穩定劑/PS-050血管緊張轉化1Elisa
嗜鹽細屬 蛋白/穩定劑/PS-010流行性出血熱IgG抗體Elisa
短小克銀漢霉 蛋白/穩定劑/PS-00115-deoxy-前列腺J2Elisa
傷寒沙門氏 粘附液/301-026-015抗能受體M2抗體Elisa
干草鞘氨單胞 粘附液/301-025-015CD64分子Elisa
黃桿 蛋白膠染液 /300-692-1000磷酸乙酸磷酸Elisa
假單胞屬 蛋白膠染液 /300-692-500p38絲裂原活化蛋白激Elisa
天青鏈霉 AquaSafe 安全保鮮劑/22-100-01神經肽SElisa
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