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詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調控；
⑤細胞分化及其調控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
產品屬性：
中文名稱：臺盼藍染色法細胞活力檢測試劑盒
英文名稱：Typan Blue Staining Cell Viability Assay Kit
產品規格：100T
發貨周期：1～3天
商品介紹：
本試劑盒各組分均以無菌形式提供，可直接用于細胞實驗。臺盼藍（Trypan Blue），一種偶氮、親水性酸性藍色染料，可透過死亡細胞和垂死細胞的細胞膜，將其染成藍色，而活細胞由于其細胞膜的完整性，可將臺盼藍排斥在外，因此，通過顏色的變化即可將活細胞（活細胞呈透明無色）和死細胞鑒別開來，基于此原理，本品廣泛用于細胞活性水平的常規評估。臺盼藍還可染色膠原和淀粉樣蛋白。臺盼藍與蛋白結合形成的復合物可發出紅色熒光。另外，臺盼藍（合適濃度）還常用來淬滅細胞表面的自熒光或者其他熒光信號。 使用方法 1）對于懸浮細胞，離心收集細胞，對其充分清洗后，加入適量細胞重懸液重懸細胞制成單細胞懸液；對于貼壁細胞，先用胰酶消化細胞，再按照懸浮細胞的方法制備單細胞懸液。 2）取0.1ml單細胞懸液，按照1:1比例與0.1ml 0.4%臺盼藍染色液充分混勻，室溫染色3~10min。 【注】：因臺盼藍具有細胞毒性，染色時間過久會導致部分死細胞染色，干擾計數。通常染色3min即可。 3）取少量上述染色細胞加入，于顯微鏡低倍鏡下計數，分別計算著色細胞（即損傷細胞和死細胞）和總細胞。 【注1】：用移液槍加染色細胞時，沿著蓋玻片的邊緣輕輕加液使其*覆蓋住整個小室。不可過量加液或者不足量。 【注2】：1mm2方格內細胞數通常控制在20-50 cells，當細胞數超過200個，需重新調整稀釋倍數。 4）按照以下公式來計算細胞數目和活細胞百分比， a，計算每ml細胞數目：Cells/ml=1mm2大方格內的平均細胞數×稀釋倍數×104；【注】：此時的稀釋倍數為：步驟2所取的單細胞懸液與臺盼藍染色液混合后的稀釋倍數 b，總細胞數目：Total cells=（Cells/ml）×初制備單細胞懸液的總體積 c，細胞活力值：Viability（%）=（總細胞數-總著色細胞數）/總細胞數×100 【注】：通常情況，健康的對數期培養細胞，活細胞至少占到95%。 儲存條件：室溫，有效期2年 |
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
單核細胞趨化蛋白2(MCP2)英文名稱：MCP2 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白144A抗體包裝25g
單核細胞趨化蛋白1(MCP1)英文名稱：MCP1 ELISA Kit周期B3抗體包裝1g
單氧化A(MAOA)英文名稱：MAOA ELISA Kit羧肽X(M14家族2)抗體包裝25g
存活(Surv)英文名稱：Surv ELISA Kit上皮鈣粘附分子結合蛋白E7包裝5g
簇集蛋白(CLU)英文名稱：CLU ELISA Kit周期D結合蛋白1抗體包裝1g
促胰液(SCT)英文名稱：SCT ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白120抗體包裝5g
促微管蛋白聚合蛋白(TPPP)英文名稱：TPPP ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白23抗體包裝1g
促泌(SCGN)英文名稱：SCGN ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白89抗體包裝25g
刺猬因子相互作用蛋白(HHIP)英文名稱：HHIP ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白30抗體包裝5g
次磷核糖基轉移1(HPRT1)英文名稱：HPRT1 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白40抗體包裝5mg
雌激受體β(ERβ)英文名稱：ERβ ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白114抗體包裝100g
雌激受體α(ERα)英文名稱：ERα ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白39抗體包裝25g
垂體腺苷環化激活肽(ADCYAP1)英文名稱：ADCYAP1 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白34抗體包裝25g
穿孔1(PRF1)英文名稱：PRF1 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白75抗體包裝5g
成纖維細胞生長因子受體3(FGFR3)英文名稱：FGFR3 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白65抗體包裝25g
光硬皮馬勃Scleroderma│cepa Pers. 質量規格：含量>98.5%，類白色粉末游離三狀腺原試劑盒鹽白屈菜紅堿;Chelerythrin
嗜鹽潮間帶桿菌Aestuariibacter│halophilus 質量規格：>99%,USP31游離肉堿銀杏酚;Ginkgolic acids
豬鏈球菌Streptococcus│suis 質量規格：HPLC>98%,標準品游離前列腺特異性抗原試劑盒野菊花內酯;Yejunualactone
臺盼藍染色法細胞活力檢測試劑盒粟酒裂殖酵母 3-甲氧基-4-氯苯甲EB病早期抗原IgAElisa
鞘氨單胞 2-氯-5-甲氧基苯甲蓖麻抗體Elisa
蜂房哈夫尼 1-異基哌β-乙型溶血性鏈球Elisa
食酸屬（噬酸屬） 1-(四氫-2H-吡喃-4-基)乙酮弓形蟲Elisa
蘇云金芽孢桿 1-甲基-1h-咪唑-4-磺酰氯父系表達基因2Elisa
細交鏈孢霉 2,6-二氟苯膜結合型前列腺E合成1Elisa
產芽孢梭（生孢梭） 4-甲氧基-3-SCETINElisa
新疆糖單孢 2-羥基-3-硝基-5-氟吡啶角化生長因子2Elisa
葡萄穗霉 7-氮雜-2-羧酸20S蛋白體Elisa
球黑孢霉 5-氯-2-苯酚26S蛋白體Elisa
蠟狀芽孢桿 (R)-3-氟吡咯烷(HCL)HA tag標簽Elisa
球形賴氨酸芽孢桿 (S)-(+)-3-氟吡咯烷鹽酸鹽系統性紅斑狼瘡Elisa
枇杷假尾孢 2,6-二氟甲酯沉默調節蛋白1Elisa
辣乳菇 5-氯-2,4-二氟苯磺酰氯組織蛋白FElisa
蠟狀芽孢桿 4-(三氟甲基)-2-巰基嘧啶膽紅氧化代謝物Elisa
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