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詳細介紹
商品介紹：
本試劑盒是一種常用的比色法檢測細胞增殖和毒性的試劑盒，其檢測原理：磺酰羅丹明（Sulforhodamine B，SRB）是一種水溶性蛋白染料，能與細胞內蛋白堿性氨基酸結合形成復合物，其結合于細胞中總蛋白量的多少可以反映細胞數的多少。在515nm波長處測得的吸光值與細胞數呈良好的線性關系。 本試劑盒檢測速度快、線性好、操作簡單方便，以96孔板為例，可檢測500次。 使用方法（以96孔板為例） 1）取出細胞，棄去培養液； 2）小心加入固定液，每孔100μl，4℃孵育1h，棄去固定液； 3）加入清洗液1，每孔100μl，室溫下靜置30s，棄去清洗液1，重復該步驟； 4）加入染色液，每孔50μl，室溫下避光孵育15min，棄去染色液； 5）加入清洗液2，每孔100μl，棄去清洗液2（該步驟需快速完成，以免染色漏出胞外），重復該步驟5-10次，直至把多染料洗盡為止； 6）加入溶解液，每孔100μl，室溫下避光孵育5min； 7）于515nm波長檢測其吸光值。 儲存條件：4℃，有效期1年 |
產品屬性：
英文名稱：SRB Cell Proliferation and cytotoxicity assay kit
產品規格：500T
發貨周期：1～3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調控；
⑤細胞分化及其調控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
蛋白激活受體3(PAR3)英文名稱：PAR3 ELISA Kitα1-chimaerin蛋白抗體包裝25g
蛋白激活受體2(PAR2)英文名稱：PAR2 ELISA Kit信號轉導蛋白9復合體7b抗體包裝5g
蛋白3(PR3)英文名稱：PR3 ELISA Kit鈣調神經磷調節蛋白1抗體（唐氏綜合征候選區域蛋白1樣蛋白1）包裝1g
蛋白磷3調節因子亞基1(PPP3R1)英文名稱：PPP3R1 ELISA Kit鈣調神經磷調節蛋白3抗體（唐氏綜合征候選區域蛋白1樣蛋白3）包裝5g
蛋白酪磷受體O(PTPRO)英文名稱：PTPRO ELISA KitCentaurin α1抗體包裝1g
蛋白酪磷受體H(PTPRH)英文名稱：PTPRH ELISA KitB淋巴白血病/淋巴瘤11/鋅指蛋白856抗體包裝5g
蛋白激抑制因子γ(PKIγ)英文名稱：PKIγ ELISA KitB淋巴白血病/淋巴瘤11B抗體包裝25g
蛋白激抑制因子β(PKIβ)英文名稱：PKIβ ELISA Kit鈣平衡調節蛋白1抗體包裝5g
蛋白激N2(PKN2)英文名稱：PKN2 ELISA Kit阿爾茨海默病淀粉樣蛋白相關膠原蛋白抗體包裝100mg
蛋白激D1(PRKD1)英文名稱：PRKD1 ELISA Kit老年癡呆相關類鈣粘蛋白CS1抗體包裝1g
蛋白激Cη(PKCη)英文名稱：PKCη ELISA Kit凋亡誘導蛋白NALP3抗體包裝25g
蛋白激Cζ(PKCζ)英文名稱：PKCζ ELISA Kit豬圓環病Ⅱ型衣殼蛋白抗體包裝5g
蛋白激Cε(PKCε)英文名稱：PKCε ELISA Kit血管加壓激活鈣啟動受體蛋白1抗體包裝25g
蛋白激Cδ(PKCδ)英文名稱：PKCδ ELISA Kit干生長因子受體/表面分化抗原抗體包裝5g
蛋白激Cα相互作用蛋白1(PICK1)英文名稱：PICK1 ELISA Kit離子通道蛋白6抗體包裝1g
根瘤菌Rhizobium│sp. 質量規格：purity>99.0%,BR魚精蛋白1試劑盒葉黃;Xanthophyll
粗壯假絲酵母Candida│valida 質量規格：HPLC>99%,標準品誘導型一氧化氮合成試劑盒愈創木酚;Guaiacol
: Charwoman資源名稱: 鏈球菌 質量規格：含量>99.0%有絲分裂原活化蛋白激14試劑盒異丁香酚;Isoeugenol
磺酰羅丹明B(SRB)細胞增殖和毒性檢測試劑盒東方異擔子 2-氯-5-甲氧基吡啶恙蟲病IgM抗體Elisa
交鏈孢霉 四氨合氯化鉑溶液衣原體IgA抗體Elisa
黃青霉 乙二四乙酸二鈉難辨梭狀芽孢桿BElisa
阿孫鏈霉 3-芐基類缺陷病1Elisa
米根霉 2',3',4'-氧基苯乙酮鄰苯二甲酸酯Elisa
斜蓋傘 咪唑[1,2-A]吡啶-6-甲酸鄰苯二甲酸單乙基己基酯Elisa
球孢白僵 反式-2-己烯酸甲酯巨病Elisa
灰銹赤鏈霉 2-氨基-2,3-二甲基丁風疹病Elisa
蘇云金芽孢桿 泮托拉唑鈉單純皰疹病抗原1Elisa
海膽橙色小單孢 右癌易感蛋白1Elisa
平菇 4-氧丁酸甲基酯巨病IgM抗體Elisa
糞生糞殼 鄰氯肉桂腦源性神經營養因子Elisa
蠟狀芽孢桿 4-氟-2-酮粉塵螨特異性IgE4抗體Elisa
Pseudomonas 2-氯-5-(苯甲氧基)嘧啶多聚組氨酸標簽Elisa
同合小克銀漢霉 4-甲酰基-1-甲酸芐酯狼瘡抗凝物Elisa
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