詳細介紹
商品介紹:
用途: 用于生物化學活性分析、免疫分析以及組織和細胞的組織化學染色,多用于轉基因植物的GUS基因表達。 注意事項: 染色原理是適宜的反應條件下,β-葡萄糖苷酶(GUS)可將X-Gluc水解成藍色物質,該物質不溶解于轉基因的細胞核組織中的靛藍物質,具有GUS活性的部位或位點呈現藍色或藍色斑點,可用肉眼或顯微鏡觀察到。 儲存條件:-20℃,避光,12個月 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
100ml | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
黑曲霉艾滋病病復制結合蛋白抗體Human KLHL21 ELISA Kit小鼠胎盤泌乳(PL)免疫試劑盒
紅菇屬AFP4b蛋白抗體Human KLHL22 ELISA Kit小鼠鎖鏈免疫試劑盒
泡盛曲霉HIV-1病復制結合蛋白2抗體Human KLHL29 ELISA Kit小鼠羧化不全骨鈣(ucOC)免疫試劑盒
多主葡萄殼菌伴侶蛋白bc1同源復合體抗體Human KLHDC3 ELISA Kit小鼠髓樣觸發性受體2(TREM2)免疫試劑盒
梭菌心肌錨蛋白重復結構域1抗體Human KLHL3 ELISA Kit小鼠髓樣分化因子88(MyD88)免疫試劑盒
楊生盾殼霉抑制蛋白結構域蛋白1抗體Human KLHL31 ELISA Kit小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)免疫試劑盒
枯草芽胞桿菌抑制蛋白結構域蛋白2抗體Human KLHDC4 ELISA Kit小鼠髓過氧化物特異性抗中性粒胞質抗體 免疫試劑盒
嗜熱脂肪地球芽胞桿菌抑制蛋白結構域蛋白3抗體Human KLHL32 ELISA Kit小鼠髓過氧化物(MPO)免疫試劑盒
枯草芽胞桿菌抑制蛋白結構域蛋白4抗體Human KLHDC5 ELISA Kit小鼠性磷(ACP)免疫試劑盒
白靈側耳雌二抗體Human KLHL29 ELISA Kit小鼠性成纖維生長因子(aFGF/FGF-1)免疫試劑盒
黑曲霉淀粉樣蛋白β前體樣蛋白2抗體Human KLHL3 ELISA Kit小鼠性β葡萄糖苷(GBA)免疫試劑盒
蘋果黑腐皮殼淀粉樣蛋白β前體樣蛋白1抗體Human KLHDC3 ELISA Kit小鼠絲裂原激活的蛋白激/MAP激(Mapk1/Erk2/Mapk/Prkm1)免疫試劑盒
茄鏈格孢菌轉錄激活蛋白crsp70抗體Human Kindlin 2 ELISA Kit小鼠絲轉肽抑制劑Kazal type 3(SPINK3)免疫試劑盒
根瘤菌卵巢、胎盤、前列腺、蛋白22抗體Human KIR2DL3 ELISA Kit小鼠水通道蛋白9(AQP-9)免疫試劑盒
三葉草根瘤菌錨蛋白重復結構域蛋白33B抗體Human KLHL31 ELISA Kit小鼠水通道蛋白5(AQP-5)免疫試劑盒
平菇載脂蛋白C3抗體Human KIR2DS4 ELISA Kit小鼠水通道蛋白4(AQP-4)免疫試劑盒
: NBRC12714資源名稱: 凝結芽孢桿菌 質量規格:Type I-S; from bovine submaxillary glands白介6受體試劑盒9-硝基
仁果叢梗孢Monilia│fructigena (Pers.) Pers. 質量規格:>98%,EP白介6試劑盒香草
鏈格孢Alternaria│alternata (Fr.) Keissl. 質量規格:>98%,BR白介5受體alpha試劑盒雪松
GUS染色液枯草芽胞桿 2,2,2-三酯核糖核酸IgG抗體Elisa
蘋果鏈格孢 鹽酸米托蒽醌羥甲基戊二酸單酰Elisa
大腸埃希 4-甲氧基-3-硝基吡啶尿激型纖溶原激活物Elisa
盤長孢狀盤孢 甲基對甲苯砜鈣非依賴型磷脂A2Elisa
金黃色葡萄球金黃亞種 7-氟滿二酮磷酸化雷帕霉靶蛋白Elisa
卡利比克邁耶氏酵母 4,5-二甲基-1,2-苯二死骨片1Elisa
季也蒙畢赤酵母 4-甲基-2-甲氧基自噬基因Beclin 1Elisa
茶炭疽病 2-乙基己酸鹽自噬相關蛋白5Elisa
枯草芽孢桿 2',4'-二-5'-氟苯乙酮微管相關蛋白1A;1B輕鏈3BElisa
大腸埃希氏(大腸桿) 對甲苯磺酰氧甲基膦酸二乙酯低密度脂蛋白受體相關蛋白1Elisa
綠僵 3,5-二溴-2-羥基磷酸化乙酰Elisa
矩圓黑盤孢 2,4-二羥基苯甲酰鞘磷脂合成1Elisa
科羅拉多擬無枝酸 3-乙?;姿峄阴t然疎lisa
釀酒酵母 氟苯咪唑硝基還原Elisa
灰色鏈霉灰色亞種 2-甲基-2-戊烯酸血紅加氧Elisa