商品介紹:
用途: 漿細(xì)胞核深藍(lán)色,胞質(zhì)灰藍(lán)色。 儲(chǔ)存條件:室溫,避光,6個(gè)月 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:天青A-伊紅染色液
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:2×50ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
芽孢桿菌二磷腺苷核糖基化因子鳥嘌呤核苷交換因子2抗體Human KLHDC4 ELISA Kit小鼠糖原磷化同工MM(GP-MM)免疫試劑盒
孢吸水鏈霉菌α增強(qiáng)子結(jié)合蛋白1抗體Human KLHL32 ELISA Kit小鼠糖原磷化同工II(GP-II)免疫試劑盒
荷葉蘑脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)10抗體Human KLHL35 ELISA Kit小鼠糖原磷化同工BB(GP-BB)免疫試劑盒
多欄純潔桿菌蛋白激A錨定蛋白7抗體Human KLHL34 ELISA Kit小鼠糖原合成激(GSK)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體12抗體Human KRT12 ELISA Kit小鼠糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)免疫試劑盒
Arthrobacter腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體9抗體Human KLHL10 ELISA Kit小鼠糖皮質(zhì)類固受體(GR)免疫試劑盒
弗雷德里克斯堡假單胞菌三磷腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4抗體Human KRT33B ELISA Kit小鼠糖皮質(zhì)激受體β(GR-β)免疫試劑盒
孢小克銀漢霉肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白LIM3抗體Human KRT34 ELISA Kit小鼠糖皮質(zhì)激受體α(GR-α)免疫試劑盒
球孢白僵菌高爾基復(fù)合體相關(guān)蛋白1抗體Human KRT36 ELISA Kit小鼠糖類抗原199(CA199)免疫試劑盒
暗灰鏈霉菌乙酰羧化1ACCα抗體Human KLHL4 ELISA Kit小鼠糖類抗原125(CA125)免疫試劑盒
釀酒酵母腺嘌呤核苷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1、2、3、4抗體Human KLHL9 ELISA Kit小鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)免疫試劑盒
芽孢桿菌去整合樣金屬蛋白12Human KLRF1 ELISA Kit小鼠糖蛋白130(gp130)免疫試劑盒
大腸桿菌磷化乙酰羧化1ACCα抗體Human KRT40 ELISA Kit小鼠碳酐2(CA-2)免疫試劑盒
卡爾斯巴德唯鹽菌膜粘連蛋白2受體抗體Human KPNA1 ELISA Kit小鼠碳酐1(CA-1)免疫試劑盒
單孢共頭霉晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體抗體Human KLRG1 ELISA Kit小鼠胎球蛋白A(Fetuin A)免疫試劑盒
奇異球菌ADCK5蛋白抗體Human KLHL28 ELISA Kit小鼠胎盤生長因子(PLGF)免疫試劑盒
芽孢桿菌屬Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:38000~42000 mpa.s白介8試劑盒香葉
谷棒桿菌Corynebacterium│glutamicum 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR白介8試劑盒小檗紅堿硫酯
短桿菌Brevibacterium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,5N白介7試劑盒腺嘌呤
天青A-伊紅染色液孔狀短小莖點(diǎn)霉 2-氟苯基乙花生四烯酸5-脂氧合Elisa
香菇 2,6-二甲基-4-羥基苯甲色P450 1B1Elisa
黑青霉 2-(2-乙氧基苯氧基)溴乙烷角蛋白生長因子受體Elisa
固氮野野村氏 3-甲基-4-異基葉綠Elisa
異型薄孔 3,5-雙(三氟甲基)芐溴單?;视王lisa
桔橙小單孢 4,6-二-2-三氟甲基嘧啶磷酸化酪氨酸激2Elisa
禾谷鐮刀 5-甲基煙酸α2肌動(dòng)蛋白Elisa
釀酒酵母 3,5-二苯磺酰甘肽Elisa
盤長孢狀盤孢 3,4-二乙信號(hào)4AElisa
硝酸鹽還原海桿 3-N-異戊基-N-乙氨基-6-甲基-7-苯氨基熒烷去唾液酸糖蛋白受體Elisa
香栓孔 反式-4-甲基環(huán)己基異酸酯間羥去甲腎上腺Elisa
加州鏈霉 1--3,5-二甲氧基苯3-甲氧基腎上腺Elisa
木賊鐮孢 4-氟-2-甲酸沙門氏Elisa
嗜堿海螺 2-氟-5-甲酸血管緊張轉(zhuǎn)化1Elisa
膠紅酵母 1H-吲唑-6-羧酸D-乳糖Elisa