詳細(xì)介紹
熒光定量PCR試劑盒:
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進行Real Time PCR擴增反應(yīng)的全新預(yù)混系統(tǒng),能大幅度提高產(chǎn)物特異性和反應(yīng)靈敏度。同時,提供ROX作為內(nèi)參染料。該試劑盒的熒光強度為同類產(chǎn)品的3-5倍,能更靈敏的、更直觀的反應(yīng)目的模板DNA的濃度。產(chǎn)品僅用于科研
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動Foregene Taq DNAPolymerase,該酶相對于普通Taq酶具有擴增效率高、特異性擴增能力強、錯配率低等優(yōu)點。用于熒光定量PCR反應(yīng)可減少非特異性擴增,提高PCR的準(zhǔn)確性。
中文名稱:黃桿菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Tenacibaculum spp.
貨號:GOY-M4553
規(guī)格:50T
產(chǎn)品特性: 高特異性:本產(chǎn)品采用熱啟動 DNA 聚合酶,90℃以上 2min 后具有擴增活性,可大大提高 PCR 產(chǎn)物的特 異性。 靈敏度:本產(chǎn)品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測低拷貝數(shù)的模板,且重復(fù)性好。 高適用性:本產(chǎn)品可適用于任意熒光定量 PCR 儀。
試劑盒內(nèi)容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR:包括特別改造的熱啟動 Taq DNAPolymerase、MgCl2、優(yōu)化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I、反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)增強劑、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等。PCR 反應(yīng)時,只需將適當(dāng)?shù)牧呀饣旌弦骸⒁铩Nase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應(yīng)。
ROX Reference Dye:一般用于 ABI、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴增儀上,用于調(diào)整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同,用戶可以根據(jù)儀器的推薦濃度添加。DNase-Free ddH2O:超純水,用于 PCR 反應(yīng)。
試劑盒應(yīng)用
熒光定量PCR進行模板定量分析。
常規(guī)PCR擴增。
樣品要求及注意事項:
1、 如果提供實驗材料,實驗材料必須保證新鮮,請您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑,并用干冰運輸。
2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,動植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,貼壁細(xì)胞:10cm2/mlTrigol,懸浮細(xì)胞:5×106動植物,酵母細(xì)胞或細(xì)菌細(xì)胞10×107/mlTrigol。
3、 如果提供RNA或cDNA我們要對您提供的材料進行評估。
4、 實時熒光定量PCR服務(wù)您一定要提供樣品及要擴增基因的詳細(xì)信息。
熒光定量PCR原理:
熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
端羥基外消旋聚乳酸(重均分子量57-73萬)3147-14-6豚鼠巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)ELISA Kit
端羥基外消旋聚乳酸(重均分子量6-9.5萬)154361-50-9豚鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA Kit
端羥基外消旋聚乳酸(重均分子量73-109萬)66335-38-4豚鼠黃體激素(LH)ELISA Kit
端羥基外消旋聚乳酸(重均分子量9.5-16萬)436349豚鼠環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA Kit
端羥基右旋聚乳酸(重均分子量0.3-1.5萬)62571-86-2豚鼠環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)ELISA Kit
端羥基右旋聚乳酸(重均分子量1.5-3萬)298-46-4豚鼠過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶(LPO)ELISA Kit
端羥基右旋聚乳酸(重均分子量102-137萬)10605-21-7豚鼠鉤端螺旋體IgG(Leptospira)ELISA Kit
端羥基右旋聚乳酸(重均分子量137-170萬)38821-49-7豚鼠甘油醛-3-磷酸脫酶(GAPDH)ELISA Kit
端羥基右旋聚乳酸(重均分子量17-26萬)85933-19-3豚鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長因子(SCF/MGF)ELISA Kit
端羥基右旋聚乳酸(重均分子量170-206萬)41575-94-4豚鼠鈣調(diào)素(CAM)ELISA Kit
端羥基右旋聚乳酸(重均分子量206-288萬)72956-09-3豚鼠端粒酶(TE)ELISA Kit
端羥基右旋聚乳酸(重均分子量26-36萬)66592-87-8豚鼠膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)ELISA Kit
端羥基右旋聚乳酸(重均分子量3-5.5萬)42540-40-9豚鼠膽堿脂酶(CHE)ELISA KitIrinotecan Related CoMpound B;(S)-4,11-diethyl-4,9-dihydroxy-1H-pyrano[3',4':6,7]indolizi,2-b]quinoline-3,14(4H,12H)-dione 二羥茶堿E
3-Mercapto-2-butanolChicken RBP4 (Retinol Binding Protein 4, Plasma) ELISA Kit
黃桿菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒IsoaMyl caproate;γ-Methylbutyl hexanoate;Caproic acid isopentyl ester;Isopentyl caproate;IsoaMyl hexanoate 二麻醉椒苫素
3-TERT-BUTYL-2-HYDROXYBENZALDEHYDEChicken EFNA5 (Ephrin A5) ELISA Kit
IsoaMyl ether;DiisoaMy ether;3-Methyl-1-(γ-Methyl butoxy)butane;1,1′-Oxybis[3-Methylbutane];lsopentyl ether 二醉椒素
3-tert-ButylphenolChicken CTSL (Cathepsin L) ELISA Kit
IsoaMyl MethoxycinnaMate 丹葉大黃素
3-PENTENENITRILEChicken CRH (Corticotropin Releasing Hormone) ELISA Kit
Isobutyryl chloride;Isobutyroyl chloride 冬綠苷
3-Nitrophthalic acidChicken DNM2 (Dynamin 2) ELISA Kit
Isoflurane Related CoMpound A;1-Chloro-2,2,2-trifluoroethyl chlorodifluoroMethyl ether 地黃苷D
3-Bromopropylamine hydrobromideChicken BAD (Bcl2 Associated Death Promoter) ELISA Kit
相對定量簡介:
分析方法: ①雙標(biāo)曲法 ②2 - △Ct ③2 - △△Ct ④Pfaffi法
①雙標(biāo)準(zhǔn)曲線法簡介
公式:
優(yōu)點:分析簡單,實驗優(yōu)化簡單產(chǎn)品僅用于科研
缺點:對每一個基因,每一輪實驗都必需做標(biāo)準(zhǔn)曲線;必需有固定的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線;這些標(biāo)準(zhǔn)品并不代表樣品擴增的真實狀態(tài)應(yīng)用:基因表達調(diào)控研究中用與*的兩種相對定量方法之一。