詳細介紹
商品介紹:
用途: 退行性染色液,適用于石蠟切片染色 注意事項: Gill No.3蘇木素染色液又稱GillⅢ液,為正常濃度的2倍,石蠟切片染色大于15分鐘。屬于半氧化蘇木素,比Harris蘇木素穩定,染色需鹽酸乙醇分化,其缺點是:黏附的明膠甚至玻片也會染色。 儲存條件:室溫,12個月 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
100ml|500ml | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
土貝母苷乙英文名稱: Arbutin組織相關抗原HLA-B15抗體包裝25g
土鱉蟲(地鱉)(標準品)英文名稱: Sanguinarine chloride蛋腺苷轉移抗體包裝5g
土鱉蟲(冀地鱉)(標準品)英文名稱: Secoisolariciresinol Diglucoside磷化絲裂原活化的蛋白激p38β抗體包裝100ml
土大黃(標準品)英文名稱: Aminomalonic acid 磷化自噬微管相關蛋白輕鏈3抗體包裝25ml
土大黃苷(標準品)英文名稱: AZD-4547粘蛋白-5B抗體包裝5g
土茯苓(標準品)英文名稱: Zineb粘蛋白-3抗體包裝1g
土槿皮(標準品)英文名稱: Wilforine雞馬立克氏病火雞皰疹病抗體包裝1g
土荊芥(標準品)英文名稱: Neogambogic acid多藥耐藥蛋白/P-糖蛋白抗體(C端)包裝5g
土荊皮(金錢松)(標準品)英文名稱: Diosgenin glucoside硝唑抗體包裝25g
土荊皮(標準品)英文名稱: N-p-CouMaroyltyraMine;Paprazine黑色瘤相關抗原4抗體包裝5g
土荊皮乙(標準品)英文名稱: Bergenin鈣結合蛋白39抗體包裝10g
土壟大白蟻巢(標準品)英文名稱: Bergenin線粒體抗病信號MAVS蛋白抗體包裝50g
土木香(標準品)英文名稱: Palmatine hydrochloride巨噬集落激因子受體抗體包裝1g
土木香內酯(標準品)英文名稱: Palmatine hydrochloride腫瘤轉移相關蛋白1抗體包裝25g
土牛膝(標準品)英文名稱: Phellodendrine chloride粘蛋白4抗體包裝5g
纖維堆囊菌Sorangium│cellulosum 質量規格:HPLC>98.0%,標準品卷曲螺旋, 肌球蛋白樣BCL2 結合蛋白/自噬基因Beclin 1試劑盒常山乙;Febrifugine
粘帚霉Gliocladium│sp. 質量規格:HPLC>85%,二BR卷曲蛋白8試劑盒車葉草苷;Asperuloside
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格:HPLC>98.0%,標準品聚集蛋白試劑盒草;Oxalic acid
Gill蘇木素染色液(Gill No.3)棱蓋多孔 4--2,8-雙(三氟甲基)喹啉綠色熒光蛋白Elisa
梨黑斑鏈格孢 3--4-甲酸美金剛Elisa
樟疫霉 2',4'-二甲氧基苯乙酮錳超氧化物歧化Elisa
貝倫格勒座腔梨專化型 N-((S)乙氧羰基-1-丁基)-(S)-氨酸糜蛋白Elisa
釀酒酵母 4-(4-氨基苯基)啉-3-酮球蛋白AElisa
Phoma medicaginis var. medicaginis 基環己基環己球蛋白DElisa
松乳菇 (S)-(-)-1-(3-甲氧苯基)乙球蛋白EElisa
黃蓋蜜環 (S)-3-二甲基氨基-3-苯球蛋白GElisa
粉狀畢赤氏酵母 O-叔丁基-L-蘇氨酸球蛋白G1Elisa
黑絡丸 8-氨基萘磺酸球蛋白G2Elisa
釀酒酵母 3-溴鄰苯二甲酸酐球蛋白G2aElisa
枯草芽孢桿 5-溴-2-三氟球蛋白MElisa
平臍蠕孢 N-磺酸丁基吡啶硫酸氫鹽繆勒管抑制物質;抗繆勒管Elisa
根瘤 3-吡唑-4-甲酸乙酯膜聯蛋白-A2Elisa
枯草芽孢桿 肉桂,順式+反式末端補體復合物Elisa