詳細介紹
商品介紹:
IOWH-032是CFTR抑制劑,在T84和CHO-CFTR細胞實驗中IC50為1.01uM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1191252-49-9 別名:IOWH032 分子式:C??H??Br?N?O? 分子量:545.18 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
IOWH-032 | 1mL(10mM)|10mg|50mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
蠟樣芽胞桿菌乙肝病衣殼蛋白抗體Human SHC ELISA Kit大鼠6前列腺F1a(6-keto-PGF1a)免疫試劑盒
黑曲霉型肝炎病1a基因型NS5蛋白抗體Human MUC20(Mucin-20) ELISA Kit大鼠6前列腺(6-K-PG)免疫試劑盒
三葉草根瘤菌戊型肝炎病抗體Human SHE ELISA Kit大鼠Ⅴ型膠原(Col Ⅴ)免疫試劑盒
灰肉色鏈霉菌HMG盒區(qū)內含蛋白1抗體Human SH3PXD2A ELISA Kit大鼠5-羥色轉運體(5-HTT/SERT)免疫試劑盒
桑帕約氏酵母血紅蛋白theta亞型1抗體Human SH3GL3 ELISA Kit大鼠5羥色(5-HT)免疫試劑盒
屎腸球菌hbs1樣蛋白抗體Human HAAO(3-hydroxyanthranilate 3,4-dioxygenase) ELISA Kit大鼠5羥基吲哚乙(5-HIAA)免疫試劑盒
蛹蟲草*縮復合物亞型蛋白3抗體Human SH2D4A ELISA Kit大鼠5羥二十碳四烯(5-HETE)免疫試劑盒
鞘盒菌屬RNA結合蛋白39抗體Human SH3BGR ELISA Kit大鼠5'-核苷,胞膜(NT5E/CD73)免疫試劑盒
巨型艾美耳球蟲全色C合成抗體Human SH2D5 ELISA Kit大鼠5核苷(5-NT)免疫試劑盒
葡萄座腔菌血紅轉運蛋白1抗體Human SH3BGRL2(SH3 Domain Binding Glutamate Rich Protein Like 2 ) ELISA Kit大鼠5'-AMP活化蛋白激α-2催化亞基(PRKAA2)免疫試劑盒
金龜子綠僵菌小孢變種血紅轉運蛋白5抗體Human SH3BGRL3(SH3 domain-binding glutamic acid-rich-like protein 3) ELISA Kit大鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)免疫試劑盒
栗疫菌造血信號轉導蛋白抗體Human SH3BP1 ELISA Kit大鼠4-羥基壬烯(HNE)免疫試劑盒
魯杰氏菌鹵脫鹵樣水解域內含蛋白1A抗體Human SH2D2A ELISA Kit大鼠Ⅲ型前膠原基末端肽(PⅢNP)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌E3連接抑制受體抗體Human SH2D3A ELISA Kit大鼠Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢNT)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌His 結構域內含酪磷蛋白抗體Human SH2D3C ELISA Kit大鼠Ⅲ型前膠原C端肽(PⅢCP)免疫試劑盒
炭疽芽胞桿菌多聚腺苷因子Clp1蛋白抗體Human AKR1B10(Aldo-keto reductase family 1 member B10) ELISA Kit大鼠Ⅲ型前膠原(HPCⅢ)免疫試劑盒
根瘤菌(紫云英)Mesorhizobium│sp. 質量規(guī)格:分析標準品利卡靈-B
嗜熱脂肪地芽抱桿菌Geobacillus│stearothermophilus 質量規(guī)格:分析標準品去氫二異丁香酚
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質量規(guī)格:分析標準品,98.5%苷
CFTR抑制劑(IOWH-032)phospho-Ataxin-1(Ser775) 化失調癥蛋白1抗體葡萄糖 standard for GC, ≥99.5% (GC)
AVEN 凋亡、半胱蛋白激活抑制劑抗體葡萄糖 分析標準品
Kir6.2 ATP敏感性通道亞kir6.2抗體胰高血糖氫化物(人) ≥97.0% (HPLC)
AVPR2 精氨加壓受體2抗體羥萘酚藍 IND,94%(HPLC)
Bdkrb2/B2R 緩激肽B2受體抗體蘇木精 高純級,>99%(HPLC)
Axin1 軸蛋白1抗體蘇木精 Biological stain
Anei-ATX 自分泌運動因子抗體用于顯微鏡,>99.5%(HPLC),indicator (pH 5.0-6.0)
Aurora A 有絲分裂激A抗體N-羥二-N,N′,N′-三 AR,99.0%