詳細介紹
商品介紹:
用途: 內(nèi)分泌細胞顆粒染色 注意事項: 內(nèi)分泌細胞顆粒呈深藍-黑色 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:改良MacConaill鉛蘇木素染色液
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:140ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
天花粉(栝樓)(標準品)英文名稱: Linderane磷化蛋白激C底物Marcks抗體包裝250mg
天麻(標準品)英文名稱: D(+)-Glucose磷化蛋白激C底物Marcks抗體包裝1g
天麻(標準品)英文名稱: Rutaecarpine肝生長因子受體抗體包裝5g
天名精(標準品)英文名稱: Rutaecarpine磷化絲裂原活化蛋白激3K9抗體包裝5MG
天南星(標準品)英文名稱: Evodiamine受體酪激抗體包裝1g
天山雪蓮 (標準品)英文名稱: Evodiamine絲裂原活化蛋白激3K9抗體包裝5g
天仙藤(標準品)英文名稱: Schisandrin C黑皮質(zhì)3受體抗體包裝1g
甜菜堿(標準品)英文名稱: Schisandrol AMenin抑癌蛋白抗體包裝5g
甜茶(標準品)英文名稱: Schisandrol B錯配修復(fù)蛋白3抗體包裝25g
甜茶苷;甜葉懸鉤子苷(標準品)英文名稱: Schizandrin A微小染色體維持缺陷蛋白7抗體包裝5g
甜橙黃(標準品)英文名稱: Schizandrin B單核趨化蛋白2抗體(小鼠)包裝25g
甜瓜蒂(標準品)英文名稱: Schisantherin A單核趨化蛋白3抗體包裝5g
甜菊苷(標準品)英文名稱: Sipeimine單核趨化蛋白3抗體包裝1g
甜葉菊(標準品)英文名稱: Crocin巨噬炎癥蛋白18抗體包裝1g
鐵冬青;毛冬青(標準品)英文名稱: Crocin IMITF相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體包裝250mg
姬菇Pleurotus│corucopiae 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98.0%,標準品抗DNAB抗體試劑盒蒼術(shù);Atractylon
曲霉屬Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:BR,含量≥95.0%抗BP180抗體試劑盒赤松;Pinosylvin
: 400資源名稱: 鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98.0%,標準品抗BB抗體試劑盒重樓皂苷E;Progenin III
改良MacConaill鉛蘇木素染色液糖化酵母 3-氟-2-酪酪肽Elisa
側(cè)耳 2--6-氟甲苯類風(fēng)濕因子Elisa
綠色木霉 N-芐氧羰基-DL-蛋氨酸類胰蛋白Elisa
芽孢桿屬 乙基酸粒集落激因子Elisa
硬毛栓孔 O-琥珀酰亞-1,3-二甲基基脲六氟磷酸鹽粒巨噬集落激因子Elisa
拜氏色鹽桿 2-氨基-4,5-二氟裂解型糖基化終末產(chǎn)物受體Elisa
多根硬皮馬勃 1-芐基高哌αElisa
釀酒酵母 N-甲基亞氨二乙酸功能相關(guān)抗原1Elisa
平菇 1-二乙基-2-磷酸二酯Elisa
芽枝狀枝孢 2-(4-乙氧基苯基)-2-甲基磷酸二酯3BElisa
小馬勃 雙(2,4,4-基戊基)膦酸磷酸甘油酸激Elisa
溶藻弧 3-乙酰基-7氮雜磷酸果糖激1Elisa
蟬花* 6-叔丁基-4--噻吩[2,3-D]嘧啶磷酸化AKT蛋白Elisa
哈茨木霉 2,4,6-三羥基磷酸化p38絲裂原活化蛋白激Elisa
閃光須霉 4-甲氧基-2,3,5,6-四氟苯甲磷酸化Tau蛋白Elisa