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詳細介紹
以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
MTT | 250mg | 1～3天 |
商品介紹：
噻唑蘭（Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide, MTT），也稱作溴化噻唑藍四氮唑，是一種黃色染料，已經(jīng)普遍替代傳統(tǒng)的臺盼藍染色法或者放射性同位素插入法，用來檢測細胞的活力，細胞增殖以及細胞毒性分析。檢測原理在于：MTT是一種可接受氫離子的化合物染料，帶正電荷，具有細胞膜滲透性。活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能夠?qū)⑼庠催M入的MTT還原成為水不溶性的深藍色MTT-甲臜結(jié)晶，而死細胞不具有此功能。甲臜結(jié)晶是不能穿透細胞膜，因此沉積在處于增殖且未受損傷的細胞內(nèi)。甲臜結(jié)晶可用DMSO或者酸化的異丙醇溶解出來，酶標(biāo)儀下測定570 nm的吸光度反映甲臜的生成量。而甲臜的生成量與活細胞數(shù)目成正比，用以評估細胞存活狀況。 MTT也可用作免疫組化/細胞化學(xué)染色試劑，也可用來檢測NAD。MTT被快速還原成甲臜后，能夠螯合鎳，銅和鈷。鈷螯合物可參與機體氧化系統(tǒng)。 CAS：298-93-1 分子式：C18H16N5SBr 外觀：淡黃色至橙色粉末 分子量：414.3 純度：≥98% 熔點：187℃ 溶解性：溶于水，甲醇 儲存條件：4℃ |
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
泛(Ub)英文名稱：Ub ELISA Kit原癌基因CD39樣蛋白4抗體包裝100g
泛醌C還原核心蛋白Ⅱ(UQCRC2)英文名稱：UQCRC2 ELISA Kit膠原樣蛋白抗體包裝500g
翻譯調(diào)節(jié)腫瘤蛋白1(TPT1)英文名稱：TPT1 ELISA Kit腫瘤易感性候選基因5抗體包裝5g
法尼酯X受體(FXR)英文名稱：FXR ELISA Kit鈣調(diào)蛋白激激β抗體包裝1g
二酰基甘油(DAG)英文名稱：DAG ELISA Kit中心體肌動蛋白γ1/增強型PI3K蛋白抗體包裝5g
二酰甘油-O-酰基轉(zhuǎn)移同源物1(DGAT1)英文名稱：DGAT1 ELISA Kit分裂周期相關(guān)蛋白JPO2抗體包裝100g
二肽基肽Ⅳ(DPP4)英文名稱：DPP4 ELISA Kit半胱蛋白-2抗體包裝25g
二肽基肽9(DPP9)英文名稱：DPP9 ELISA Kit7號染色體開放閱讀框63抗體包裝25g
二肽基肽8(DPP8)英文名稱：DPP8 ELISA KitCD2結(jié)合蛋白3抗體包裝5g
二氫乳清脫氫(DHODH)英文名稱：DHODH ELISA Kit膠原三股螺旋重復(fù)蛋白1抗體包裝5g
二氫嘧啶脫氫(DPYD)英文名稱：DPYD ELISA Kit20號染色體開放閱讀框72抗體包裝100g
二氫硫辛轉(zhuǎn)乙酰基(DLAT)英文名稱：DLAT ELISA Kit2號染色體開放閱讀框6抗體包裝25g
二氫硫辛脫氫(DLD)英文名稱：DLD ELISA KitCD318抗體包裝5g
二級淋巴組織趨化因子(SLC)英文名稱：SLC ELISA Kit著絲粒蛋白B抗體包裝25g
兒茶酚-O-基轉(zhuǎn)移(COMT)英文名稱：COMT ELISA Kit1號染色體開放閱讀框111抗體包裝5g
谷棒桿菌Corynebacterium│glutamicum 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品孕受體試劑盒延胡索;Corydaline
傳染性法氏囊病病毒禽雙RNA病毒屬│ 質(zhì)量規(guī)格：USP,進分sigmaD8809 孕和adipoQ 受體家族成員Ⅶ試劑盒月桂氮卓;Laurocapram
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,BR,可用于培養(yǎng)孕激誘導(dǎo)阻斷因子試劑盒油;cis-9-Octadecenoi
MTT(噻唑蘭)多色節(jié)桿 2-[2-(3-甲氧基苯)乙烯]苯酚膜結(jié)合HLA-G亞型Elisa
皮氏羅爾斯通氏 3-環(huán)戊烯-1-膜結(jié)合HLA-E亞型Elisa
產(chǎn)氣莢膜梭 D型 苯氧基乙酸酐艱難梭AElisa
暗黃紫色小單孢 鉻酸鋰鞘氨激Elisa
Pseudomonas 2-吡啶基硫脲酸性神經(jīng)鞘磷脂Elisa
總狀毛霉原變型 甘氨酸錳二羥環(huán)氧苯并芘Elisa
釀酒酵母 6-氟煙酸甲酯神經(jīng)鞘磷脂Elisa
釀酒酵母 2-氯乙氧基乙酸乙酯葡萄糖-6-磷酸Elisa
巴西固氮螺 N,N-二乙基對苯二草酸鹽霍亂B亞基Elisa
咖啡擬盤多毛孢 H-D-Phe-Pna布病Elisa
少疣曲霉 反式-4-羥基-D-脯氨酸鹽酸鹽磷酸化腺苷酸活化蛋白激Elisa
冷溫木拉克酵母 恩替卡韋骨特異性堿性磷酸Elisa
蘇云金芽胞桿 草酸鐵銨β-防御118Elisa
枯草芽孢桿 N-乙酰基-D-半乳糖脫氧砒啶啉Elisa
戊糖片球 3--4-羧酸乙酯過氧亞硝基陰離子Elisa
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