詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:ACC抑制劑(PF-05175157)
英文名稱:PF-05175157
產品規格:1mL(10mM)|5mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
PF-05175157是一種廣譜乙酰輔FUA羧化酶(ACC)抑制劑,對ACC1(human),ACC2(human),ACC1(rat)和ACC2(rat)的IC50值分別為27.0,33.0,23.5和50.4nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1301214-47-0 純度:96.13% 分子式:C??H??N?O? 分子量:405.49 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
金針菇(毛柄金錢菌、冬菇)N-乙酰基轉移2抗體Human APOH(Beta-2-glycoprotein 1) ELISA Kit睫狀神經營養因子(CNTF)ELISA Kit
宇佐美曲霉富含亮重復結構域蛋白2抗體Human FST(Follistatin) ELISA Kit結核菌(Tuberculin)ELISA Kit
熱栗色鏈霉菌孤兒核受體TAK1抗體Human AKT1(RAC-alpha serine/threonine-protein kinase) ELISA Kit結核菌桿抗體IgM(TB-Ab IgM)ELISA Kit
玉米黑粉菌骨巢蛋白抗體Human COL15A1(Collagen alpha-1 XV) ELISA Kit結核菌桿抗體IgG(TB-Ab IgG)ELISA Kit
峨眉山鏈霉菌軸突生長誘向因子5抗體Human SERPINE1(Plasminogen activator inhibitor 1) ELISA Kit結合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA Kit
球孢白僵菌磷化p-IκB-α抗體Human PDGFC(Plaet-derived growth factor C) ELISA Kit結合珠蛋白(HPT)ELISA Kit
枯草芽孢桿菌G21蛋白質抗體Human INHA(Inhibin alpha chain) ELISA Kit結締組織生長因子(CTGF)ELISA Kit
暗黃紫鏈霉菌醌氧化還原抗體Human FGF2(Heparin-binding growth factor 2) ELISA Kit結締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)ELISA Kit
枯草芽孢桿菌神經肽Y1受體抗體Human KitLG(Kit ligand) ELISA Kit結蛋白(Des)ELISA Kit
淺紫灰鏈霉菌產色變種谷受體1抗體Human TIE1(Tyrosine-protein kinase receptor Tie-1) ELISA Kit結腸癌抗原(CCA)ELISA Kit
佛羅里達側耳谷受體調節蛋白2抗體Human TNFSF10(Tumor Necrosis Factor Related Apoptosis Inducing Ligand) ELISA Kit窖蛋白(Cav-1)ELISA Kit
溶血 水解1抗體Human CGA(Chromogranin A) ELISA Kit角化生長因子(KGF)ELISA Kit
雅致小克銀漢霉神經生長因子誘導蛋白抗體Human FTH1(Ferritin heavy chain) ELISA Kit角化內分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR)ELISA Kit
馬爾他布魯氏菌核孔蛋白50抗體Human FTL(Ferritin light chain) ELISA Kit膠轉蛋白(TAGLN)ELISA Kit
鴨疫里氏桿菌軸索過度生長抑制因子-A抗體Human AMH(Muellerian-inhibiting factor) ELISA Kit膠質纖維性蛋白(GFAP)ELISA Kit
乳糖細黃鏈霉菌一氧化氮合成-1抗體(神經型)Human RORC(Nuclear receptor ROR-gamma) ELISA Kit膠質源性神經營養因子(GDNF)ELISA Kit
嗜熱嗜脂肪地芽孢桿菌Geobacillus│stearothermophilus 質量規格:7-15 units/mg,來源于地衣芽孢桿菌黃楊堿
牛鏈球菌Streptococcus│bovis 質量規格:>98%,BR丁香酚
喜溫硫桿狀菌Acidithiobacillus│caldus 質量規格:>98%,標準品黃芪皂苷III
ACC抑制劑(PF-05175157)CXCL13/BCA1 B-淋巴趨化因子抗體5,5'-二溴-2,2'-聯噻吩 99%
CXCL15/Lungkine 趨化因子CXCL15抗體2,3-二溴噻吩 98%
GCK/Glucokinase 葡萄糖激抗體2,5-二溴-3-己噻吩 97%
GCS 谷氨半胱氨γ合成抗體2,5-二溴-3-辛噻吩 96%
CSF3 粒-巨噬集落激因子3抗體2,5-二溴-3,4-二硝噻吩 98%
G-CSFR 粒-巨噬集落激因子3受體抗體2,5-二溴-3-十二烷噻吩 97%
GDF-1 生長、分化因子1抗體3-十二烷噻吩 98%
GDF8/MSTN 生長分化因子8抗體2,5-二溴-3-丁噻吩 96%