產(chǎn)品屬性:
中文名稱:伊紅染色液
英文名稱:Eosin Staining Solution
產(chǎn)品規(guī)格:100ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
本染色液操作簡(jiǎn)單,不使用汞、甲醇等有毒試劑,可以用于組織切片或培養(yǎng)細(xì)胞的染色。本伊紅染色液染色后細(xì)胞漿呈粉紅色或紅色。本染色液可以和免疫熒光染色或免疫組化染色配合使用。一方面可以在本伊紅染色液染色后進(jìn)行免疫熒光染色或其它染料的染色,另一方面也可以在免疫組化染色后再進(jìn)行伊紅復(fù)染。本染色液可以重復(fù)使用,直至認(rèn)為效果不佳時(shí)再換用新的染色液。一個(gè)包裝的本染色液至少可以染色200個(gè)樣品。 注意事項(xiàng): 1. 需自備4%多聚、70%乙醇和95%乙醇。如果需要脫水、透明和封片處理,還需自備二甲苯,中性樹膠或其它封片劑。如果樣品是石蠟切片,需自備90%乙醇,無(wú)水乙醇以及二甲苯。 2. 染色液可以重復(fù)使用多次,認(rèn)為效果不佳時(shí)再更換新的染色液。 3. 第一次使用本試劑盒時(shí)建議先取1-2個(gè)樣品做預(yù)實(shí)驗(yàn)。 儲(chǔ)存條件:室溫,有效期一年。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Roxatidine acetate HCl動(dòng)力蛋白激活蛋白亞基3抗體包裝500mg
鹽昂丹司瓊(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pemetrexed動(dòng)力蛋白激活蛋白6抗體包裝1g
鹽奧洛他定(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pemetrexed脫2抗體包裝25g
鹽奧昔布寧(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: sulphadoxine磷化DNA依賴性蛋白激抗體包裝5g
鹽奧昔布寧(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: sulphadoxine防御α4抗體包裝1g
鹽貝凡洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Penicillin G, sodium salt DNA損傷結(jié)合蛋白1抗體包裝25g
鹽貝那普利/那普利(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Penicillin G, sodium salt DNA損傷結(jié)合蛋白2抗體包裝5g
鹽貝那替(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Mitiglinide calcium HydrateCD299抗體包裝25g
鹽貝尼地平(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Mitiglinide calcium HydrateC型凝集結(jié)構(gòu)域家族4成員A抗體包裝5g
鹽倍他司汀(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: PropylthiouracilC型凝集結(jié)構(gòu)域家族6成員A抗體包裝25g
鹽達(dá)莫司汀(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fluorometholone AcetateB淋巴銜接分子DAPP1抗體包裝5g
鹽海拉明(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pentabromophenyl etherDNA1樣蛋白1抗體包裝100ml
鹽海索(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 3-Amino-3-azabicyclo[3.3.0]octane hydrochloride抗菌蛋白DCD抗體包裝25g
鹽環(huán)壬酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Kasugamycin肌動(dòng)蛋白解聚因子抗體包裝5g
鹽環(huán)壬酯雜質(zhì)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tulathromycin A甘油二酯酰基轉(zhuǎn)移2抗體包裝25g
野油菜黃單胞菌Xanthomonas│campestris 質(zhì)量規(guī)格:>98%,一合物USP,BR拓樸異構(gòu)Ⅱ試劑盒山柰酚-3-O-蕓香糖苷;Kaempfe
: I-3北京制藥廠資源名稱: 氧化葡糖桿菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品脫氧皮質(zhì)試劑盒;Kaempferide
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BP,BR,可用于培養(yǎng)脫氧尿三磷試劑盒仙苷;Narcissoside
伊紅染色液釀酒酵母 2-乙氧烯14-3-3thetaElisa
異常漢遜酵母 異基乙烯基14-3-3zetaElisa
地中海中慢生根瘤* N-(2-乙基)-N-苯轉(zhuǎn)錄因子NF-E2相關(guān)因子2Elisa
慢生根瘤 甲磺酸異酯TitinElisa
青黃褐硬皮馬勃 癸二酰肼抗通透性增高蛋白抗體Elisa
釀酒酵母 5-硝基糠二乙酸酯組蛋白乙酰化H2Elisa
膠孢 N-乙基-N-苯組蛋白乙酰化H3Elisa
多主葡萄殼 3-(N,N-二甲基氨基)烯酸乙酯α3神經(jīng)節(jié)乙酰受體抗體Elisa
蜜蜂生球擬酵母 丁二酸二異酯甲腺原氨酸脫ⅠElisa
米川黃桿 乙酸乙酯甲腺原氨酸脫ⅡElisa
滑假絲酵母 1-丁基十氫萘25羥基維生D-1α羥化,線粒體Elisa
慢生根瘤 5-溴-2-異酸酯1,25-二羥維生D(3)24-羥化,線粒體Elisa
黃赭色鏈霉 2-羥基-4-氧雜三環(huán)[4,2,1,0 37]-5-壬酮可溶性CD23Elisa
米根霉 2,3,5,6-四氟對(duì)苯二甲抗含干擾誘導(dǎo)解旋C域蛋白1抗體Elisa
食砜節(jié)桿 4-吡啶乙鹽酸鹽腦型肌酸激Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)