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詳細介紹
商品介紹：
線粒體提取試劑盒用于從動物細胞或組織中分離出完整而純化的線粒體。適合于動物軟組織(肝或腦組織)和硬組織(肌肉)以及培養細胞的線粒體的制備。其制備物產量高，可以被用于細胞凋亡、信號傳遞、代謝和蛋白組學等的研究。 操作步驟： 1. 樣本處理： a. 組織勻漿：稱取100~200 mg新鮮組織如肝臟、腦、心肌等，PBS或生理鹽水沖洗，洗凈血水，濾紙吸干，用剪刀剪為碎塊放入小容量玻璃勻漿器內。加入1.0 mL冰預冷的Lysis Buffer，0℃冰浴上下研磨組織20次; b. 培養細胞勻漿：消化細胞，PBS洗滌，800g離心5~10 min收集細胞，計數。每次提取需要5×107個細胞，加入1.0 mL冰預冷的Lysis Buffer重懸細胞，將細胞懸液轉移到小容量玻璃勻漿器內，0℃冰浴研磨30~40次。 2. 將組織或細胞勻漿物轉移到離心管，4℃，1000g 離心5 min。 3. 取上清，轉移至新的離心管中，4℃，1000g再次離心5 min。 4. 取上清，轉移至新的離心管中，4℃， 12,000 g 離心10 min。離心后的上清含胞漿成分，可從中提取胞漿蛋白。將上清轉移到新離心管，線粒體沉淀在管底。 5. 往線粒體沉淀中加入0.5 mL Wash Buffer重懸線粒體沉淀，4℃，1000 g 離心5 min。 6. 取上清，轉移至新的離心管中，4℃， 12,000 g 離心10 min。棄上清，高純度的線粒體沉淀在管底。 7. 用50 -100μL Store Buffer 或合適的反應緩沖液重懸線粒體沉淀，立即使用或-70℃保存。 儲存條件：-20℃ |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
50T|100T | 1～3天 |
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
B-細胞κ-輕肽基因增強子抑制因子激β(IκBKβ)英文名稱：IκBKβ ELISA Kit胃癌多藥耐藥相關蛋白包裝5g
B-淋巴細胞趨化因子1(BLC1)英文名稱：BLC1 ELISA Kit酪蛋白激casein kinase Iα抗體包裝1g
B-淋巴細胞激活抗原B7-2(LAB7-2)英文名稱：LAB7-2 ELISA Kit磷化酪蛋白激casein kinase Iα抗體包裝1g
BMP結合內皮調節因子(BMPER)英文名稱：BMPER ELISA Kit磷化酪蛋白激casein kinase Iα抗體包裝5g
BH3相互作用域死亡激動劑(Bid)英文名稱：Bid ELISA Kit肌動蛋白調節蛋白CAPG抗體包裝5MG
Bcl2相關髓細胞白血病序列1(MCL1)英文名稱：MCL1 ELISA KitⅠ型膠原/1型膠原a1抗體包裝100mg
Bcl2關聯X蛋白(Bax)英文名稱：Bax ELISA KitⅢ型膠原蛋白/膠原蛋白3/3型膠原蛋白抗體包裝25mg
A類清道夫受體3(SCARA3)英文名稱：SCARA3 ELISA KitCD96抗體包裝1g
ATP結合盒轉運蛋白G2(ABCG2)英文名稱：ABCG2 ELISA Kit貓眼綜合征染色體候選基因2抗體包裝25g
ATP結合盒轉運蛋白C6(ABCC6)英文名稱：ABCC6 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框146抗體包裝5g
ATP結合盒轉運蛋白A1(ABCA1)英文名稱：ABCA1 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框150抗體包裝100g
Apelin13蛋白(AP13)英文名稱：AP13 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框156抗體包裝25g
Apelin12蛋白(AP12)英文名稱：AP12 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框159抗體包裝5g
Apelin蛋白(APLN)英文名稱：APLN ELISA Kit1號染色體開放閱讀框162抗體包裝5mg
AMPA離子能谷受體4(GRIA4)英文名稱：GRIA4 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框163抗體包裝1g
解脂耶羅威亞酵母Yarrowia│lipolytica 質量規格：>98.5%,BR 乙酰酯試劑盒洋川芎內酯I;Senkyunolide
刺黑烏霉菌Memnoniella│echinata 質量規格：HPLC>98%,標準品乙酰受體抗體試劑盒洋川芎內酯H;Senkyunolide
秦氏蜜環菌Armillaria│qinii H.C. Wang & J. Zhao 質量規格：含量960~1030µg/mg,USP30乙酰試劑盒洋川芎內酯A;Senkyunolide
線粒體提取試劑盒沙門氏馬凝集試驗抗原 5-氨基-3-甲基-1-苯基吡唑卵清蛋白Elisa
枯草芽孢桿 2-溴-3-甲氧基苯高遷移率族蛋白B1-IgG抗體Elisa
蘇云金芽孢桿庫爾斯塔克亞種 3-氯, 98+%高遷移率族蛋白B1-IgM抗體Elisa
產酸克雷伯氏 1-環基-6,7-二氟-1,4-二氫-8-甲氧基-4-氧代-3-喹啉羧酸高遷移率族蛋白B1-IgA抗體Elisa
果生鏈核盤 (2R,3S)-(-)-N-叔丁氧羰基-6-氧代-2,3-二苯基嗎啉抗卵巢抗體Elisa
香栓 2-辛基-2H-苯并三唑抗心磷脂抗體Elisa
栗疫 2-溴咪唑并[1,2-a]吡啶肝結合Elisa
鴨疫里氏桿 Boc-DL-色白介1受體Elisa
空泡單胞 5-乙酰基-2(1H)-吡啶酮氨基酰化1Elisa
糞生黑蛋巢 4-乙氧基鹽酸鹽死骨片1Elisa
普利茅斯沙雷氏 2,3-二氟-4-基苯CD90分子Elisa
孟氏假單胞 4-磺酰杯[4]芳烴水合物胰蛋白Elisa
畢赤酵母 5-溴-2-氟苯酸JAGGED1蛋白Elisa
漢遜德巴利酵母 N-[(1R)-2-[3-(氨基磺酰基)-4-甲氧基]-1-甲基乙基]乙酰1Elisa
香矛假單胞 1-吡唑甲蛋白C抑制物Elisa
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