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過氧化物酶染色液(氧化WG-KI法)

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更新時間:2022-04-24 11:39:16瀏覽次數:316

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產品簡介

供貨周期 現貨 規(guī)格 2×10ml|2×20ml
貨號 GOY-01X10043 應用領域 化工
主要用途 公司產品僅供科研    
過氧化物酶染色液(氧化WG-KI法)公司正在出售的產品:EGF-R/FITC 熒光標記表皮生長因子受體抗體IgG青霉V 分析標準品
EGFR/FITC 熒光標記表皮生長因子受體抗體IgG化苯汞 分析標準品
EGFRvIII/FITC 熒光標記表皮生長因子受體III型突變體抗體IgG腐霉利 分析標準品
EGFR/PE 熒光PE標記表皮生長因子受體抗體IgG二鹽 分析標準品
EGFR /Go

詳細介紹

以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:

中文名稱

英文名稱

產品規(guī)格

發(fā)貨周期

過氧化物酶染色液(氧化WG-KI法)


2×10ml|2×20ml

1~3天


商品介紹:

用途:

過氧化物酶酶染色

注意事項:

主要由固定液、WG-KI溶液等組成,混合后使用。

儲存條件:室溫,避光,12個月

公司產品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟:

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。

2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測:

染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。

建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。

2) 熒光顯微鏡檢測:

染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
商陸皂苷T英文名稱: Esculin磷化肌球蛋白輕鏈抗體包裝5g

商陸皂苷(標準品)英文名稱: Fraxetin肌肉特異性泛蛋白連接1抗體包裝1g

商陸皂苷辛英文名稱: 6,7-Dihydroxycoumarin泛蛋白連接抗體包裝25g

芍藥苷(標準品)英文名稱: 6,7-Dihydroxycoumarin單羧轉運蛋白2抗體包裝5g

芍藥內酯苷(標準品)英文名稱: Solanesol可溶性蘋果脫氫抗體包裝1g

蛇床子(標準品)英文名稱: Hesperitin蛋白激C亞性D型抗體包裝1g

蛇床子(標準品)英文名稱: Qingyangshengenin A磷化µ-型阿片受體抗體包裝5g

蛇膽汁(標準品)英文名稱: Qingyangshengenin B磷化絲裂原活化蛋白激激1/2抗體包裝1g

射干(標準品)英文名稱: 4'-Demethylepipodophyllotoxin基質金屬蛋白9抗體包裝250mg

麝香(標準品)英文名稱: Demethoxycurcumin染色體及有絲分裂蛋白MIS12抗體包裝1g

伸筋草(標準品)英文名稱: Norisoboldine單羧轉運蛋白-1抗體包裝25g

腎茶(標準品)英文名稱: Dehydrodiisoeugenol線粒體核糖體蛋白L11抗體包裝5g

升麻(興安升麻)(標準品)英文名稱: Corynoxeine促血管平滑肌分化因子抗體包裝1g

升麻-3-O-β-D-吡喃木糖苷(標準品)英文名稱: Dehydrocostus Lactone跨膜結構域4亞家族成員2抗體包裝250mg

升麻-4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷英文名稱: Genistin磷化致癌基因C-Myc抗體包裝5g

黑曲霉Aspergillus│niger 質量規(guī)格:培養(yǎng)級,效價≥180IU/mg抗U1小核核糖核蛋白70kDa試劑盒對葉百部堿;Tuberostemonin

黃土根瘤菌Rhizobium│plateaum 質量規(guī)格:BR,>98%,藥用級抗TNF-α自身抗體東莨菪內酯;Scopoletin

青霉屬Penicillium│sp. 質量規(guī)格:>99%,CP抗SS-B/La抗體丁香;Syringic acid
過氧化物酶染色液(氧化WG-KI法)泡囊側耳(鮑魚菇) 4-硝基-2H-1,2,3-三唑活性氧簇Elisa

串珠鐮孢 N-鄰苯二甲酰甘氨酸肌鈣蛋白ⅠElisa

紡錘形賴氨酸芽孢桿 5-硝基靛紅酸酐肌鈣蛋白TElisa

副豬嗜血桿 1,1'-雙(4-羥基苯基)環(huán)己烷;雙酚Z肌酐Elisa

棘孢小單胞 3-氨基-3-(4-甲氧基苯基)酸肌骨Elisa

盤長孢狀盤孢 4-甲基水楊酸甲酯肌紅蛋白Elisa

盤長孢狀盤孢 吡啶-3,4-二甲酸酐肌酸激Elisa

植物乳桿 N-Boc-4-氧代-L-脯氨酸心肌型肌酸激同工MBElisa

植物類諾卡氏 1-苯基-2-吡咯烷酮肌酸激同工MMElisa

短密青霉 1,3-二甲基-4-酮基質金屬蛋白1Elisa

大腸埃希氏桿 3-(4-?;┧峄|金屬蛋白13Elisa

香菇 3'--5'-氟苯乙酮基質金屬蛋白2Elisa

擴散炭層 (5-溴-2-)(4-乙氧苯基)甲酮基質金屬蛋白3Elisa

毛栓孔 5-溴-2--4'-乙氧基二苯基質金屬蛋白4Elisa

泡囊短波單胞 3-甲基質金屬蛋白9Elisa

 


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