麻風(fēng)桿菌染色液(改良Wade-Fite法)公司*的產(chǎn)品：Phospho-MKP1 (Ser296 + Ser318)/FITC 熒光標(biāo)記化絲裂原活化蛋白激-1抗體IgG固紅紫LB鹽 95%
MKP-2/DUSP4/FITC 熒光標(biāo)記絲裂原活化蛋白激-2抗體IgG固紫B鹽 80%
MLK3 /FITC 熒光標(biāo)記絲氨/蘇氨蛋白激MLK3抗體IgGN-2-羥哌-N'-2-磺鈉鹽 99%
Ph

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：麻風(fēng)桿菌染色液(改良Wade-Fite法)

英文名稱：

產(chǎn)品規(guī)格：3×50ml

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

南節(jié)桿菌蛋白激BHuman MAGT1 ELISA Kit小鼠粘蛋白/粘液1(MUC1)免疫試劑盒

Janibacter melonis 蛋白激BHuman MAGOH ELISA Kit小鼠再生基因蛋白1a(REG-1a)免疫試劑盒

蘇云金芽孢桿菌血管生成樣蛋白2抗體Human MAGEA8 ELISA Kit小鼠載脂蛋白H(Apo-H)免疫試劑盒

海摩替亞氏菌血管生成3/血管生成4抗體Human MAGEB1 ELISA Kit小鼠載脂蛋白E(Apo-E)免疫試劑盒

地下新鞘菌膜粘連蛋白 I抗體Human MAGEB18 ELISA Kit小鼠載脂蛋白B48(apo-B48)免疫試劑盒

Wautersiella膜粘連蛋白 Ⅱ抗體Human MAGEB4 ELISA Kit小鼠載脂蛋白B100(Apo-B100)免疫試劑盒

普雷恩毛霉活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體Human LZTS2 ELISA Kit小鼠載脂蛋白B(APOB)免疫試劑盒

干草鞘單胞菌水通道蛋白4抗體Human LZTS2 ELISA Kit小鼠載脂蛋白A5(apo-A5)免疫試劑盒

屎腸球菌活化復(fù)制因子2抗體Human MAB21L2 ELISA Kit小鼠載脂蛋白A1(Apo-A1)免疫試劑盒

黃孢原毛平革菌腺苷單磷活化蛋白激β1抗體Human MAGEB4 ELISA Kit小鼠孕激/孕(PROG)免疫試劑盒

耐輻射奇球菌糖尿病相關(guān)肽/胰島淀粉樣肽抗體Human LY96 ELISA Kit小鼠鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白(KLH)IgM抗體免疫試劑盒

仁果褐腐串珠霉血管緊張Ⅱ抗體Human LY6K ELISA Kit小鼠鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白(KLH)IgG抗體免疫試劑盒

多產(chǎn)色鏈霉菌血管緊張Ⅱ受體1抗體Human LYAR ELISA Kit小鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成(iNOS)免疫試劑盒

中慢生華癸根瘤菌血管生成-1抗體Human LYG1 ELISA Kit小鼠游離脂肪(FFA)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌膜粘連蛋白5抗體Human LYN ELISA Kit小鼠游離甲狀腺(FT4)免疫試劑盒

青色鏈霉菌重組膜粘連蛋白5抗體Human LYPLA1 ELISA Kit小鼠游離睪(F-TESTO)免疫試劑盒

根瘤菌Rhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP臂板蛋白4C試劑盒乙酰蝙蝠葛蘇林堿

匍枝根霉(黑根霉)Rhizopus│stolonifer 質(zhì)量規(guī)格：>97%,分子生物學(xué)級(jí)臂板蛋白3F試劑盒一葉萩堿

小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%，分子生物學(xué)級(jí)臂板蛋白3A試劑盒蕓苔內(nèi)酯
麻風(fēng)桿菌染色液(改良Wade-Fite法)枯草芽孢桿 2,6-二甲氧基苯甲可溶性淀粉前體蛋白αElisa

死亡谷芽孢桿 BOC-甘氨酸-N-羥基琥柏酰亞酯水蛭Elisa

異常威克漢姆酵母 3-基苯基成纖維生長因子受體4Elisa

玉蜀黍赤霉（麥類赤霉病） 6,7-二甲氧基-3,4-二氫異喹啉丁酰酯Elisa

裂褶 1-溴-2-萘甲含EGF樣模塊粘蛋白樣受體1Elisa

大孢長根菇 N-叔丁基芐腫瘤病Elisa

苛求芽胞桿 3-氨基-4-甲氧基吡啶色P450還原Elisa

解葡聚糖微桿 5-(2-呋喃基)異惡唑-3-羧酸乙酯神經(jīng)肽PElisa

紅褐肉座 N,N-二乙基十二半胱氨酰白三烯Elisa

蘋果黑腐皮殼 2-氨基-5-苯基吡啶淚腺富脯氨酸蛋白Elisa

綠色木霉 2--5-氟甲苯肺炎衣原體IgM抗體Elisa

黃絮鱗鵝膏 4-甲基煙酸甲酯白介17CElisa

茄勞爾氏 3,5-二溴-4-羥基肺炎衣原體IgG抗體Elisa

無花果曲霉變種 (R)-(+)-α-異酸酯硫磺SElisa

土生類諾卡氏 2,3-二苯基酸膜外核苷酸焦磷酸；磷酸二酯家族成員2Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)