詳細介紹
商品介紹:
本系列產品均以溶液形式提供,其中Hoechst 33342染液(1mg/ml)(SY0563)為特定濃度的產品,其濃度為1mg/ml。用于細胞核染色時,推薦工作濃度為0.5-10μg/ml。Hoechst 33342染液(即用型)(SY0499)為濃度經過優化的產品,確??梢詽M足各種常規染色的需要。 Hoechst 33342 是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料,它在嵌入雙鏈 DNA 后釋放強烈的藍色熒光,對細胞的毒性較低。Hoechst 33342 常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。也可以用于普通的細胞核染色,或常規的DNA染色。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
10ml | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
骨成型蛋白10(BMP10)英文名稱:BMP10 ELISA Kit前列環合成抗體包裝500g
谷胱甘肽過氧化1(GPX1)英文名稱:GPX1 ELISA Kit軟骨寡聚基質蛋白抗體包裝5g
谷胱甘肽S轉移ω1(GSTω1)英文名稱:GSTω1 ELISA KitT淋巴CD1A抗體包裝50MG
谷胱甘肽S轉移θ2(GSTθ2)英文名稱:GSTθ2 ELISA Kit磷化周期B1抗體包裝25g
谷胱甘肽S轉移θ1(GSTθ1)英文名稱:GSTθ1 ELISA Kit胞漿型磷脂A2抗體包裝5g
谷胱甘肽S轉移α4(GSTα4)英文名稱:GSTα4 ELISA Kit膽固酯轉移蛋白抗體包裝1g
谷胱甘肽S轉移α1(GSTα1)英文名稱:GSTα1 ELISA Kit緊密連接蛋白6抗體包裝100g
谷胱甘肽(GSH)英文名稱:GSH ELISA Kit磷化緊密連接蛋白6抗體包裝25g
谷光甘肽合成(GSS)英文名稱:GSS ELISA Kit著絲粒蛋白T抗體包裝5g
谷轉(ALT)英文名稱:ALT ELISA Kit染色體相關蛋白2抗體包裝1g
谷酰胺2(GLS2)英文名稱:GLS2 ELISA Kit著絲粒蛋白P抗體包裝5g
谷酰胺(GLS)英文名稱:GLS ELISA Kit分裂周期相關蛋白5抗體包裝250mg
谷酰胺合成(GS)英文名稱:GS ELISA Kit染色體相關蛋白2抗體包裝1g
谷脫羧2(GAD2)英文名稱:GAD2 ELISA Kit周期調控因子10抗體包裝250mg
谷脫氫(GDH)英文名稱:GDH ELISA Kit中心體蛋白97kDa抗體包裝100mg
辣椒Colletotrichum│capsici (Syd.) E.J. Butler & Bisby 質量規格:HPLC>98%,標準品載脂蛋白L1試劑盒亞油酯;Methyl Linolea
白色類諾卡氏菌Nocardioides│albus 質量規格:>98.5%,BR,可用于培養載脂蛋白H試劑盒油酯;Methyl Oleate
假格里朗蒼白桿菌Ochrobactrum│pseudogrignonense 質量規格:HPLC>98%,標準品載脂蛋白E試劑盒硬脂酯;Methyl Stearat
Hoechst 33342染液(即用型)豇豆慢生根瘤 4-氯-2,3-二氟心鈉肽Elisa
嗜熱鏈球 2-基-N-乙基乙酰白脂Elisa
新疆鹽地桿屬 2-乙烯苯酸血小板CD41-IgG抗體Elisa
桃色枝頂孢 2-氯-3-甲血小板相關IgG抗體Elisa
腸桿屬 9-氨基米諾環鹽酸鹽炭疽桿抗體Elisa
游動球屬 6-氨基-3-乙基苯酚鹽酸鹽25羥基膽固Elisa
膠孢 2-氯嘧啶-4-甲酸甲酯胃脂Elisa
Herbaspirillum canariense 2-氯-4-嘧啶甲酸熱休克蛋白糖蛋白96Elisa
檸檬假絲酵母 3-(3-溴苯基)吡唑干擾-a-2bElisa
*杏葉斑鏈格孢 2-氟肉桂生長相關蛋白Elisa
青霉屬 N-Boc-2-乙酸鞘糖脂Elisa
孟氏假單胞 蒽醌-1,8-二磺酸二環磷酰Elisa
石面單胞 N-1-Boc-N-4-Cbz-2-哌甲酸型肝炎病核心抗原Elisa
摩洛哥芽孢桿 三[2-對甲苯基吡啶-C2,N‘]銥(III)胰島受體底物1磷酸化Elisa
巨大芽胞桿 1-乙氧羰基吡咯烷-3-酮胰島受體底物2磷酸化Elisa