商品介紹:
用途: 軟骨染色 注意事項: 主要由番紅O染色液和分化液組成。染色時,注意分化時間,否則容易導(dǎo)致過染或脫色 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:軟骨染色液(番紅O法)
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:2×100ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
4-基傘形-β-D-木糖苷英文名稱: N-Acetylglycine小鼠抗聚組單克抗體包裝5g
4-羥基喹唑啉英文名稱: Ac-Ala-OH鐵調(diào)節(jié)蛋白/鐵調(diào)抗體包裝1g
4-硝基兒茶酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: N-Acetyl-D-alanine熱休克蛋白J1抗體包裝5g
4’-O-基補(bǔ)骨脂查爾B英文名稱: N-Acetyl-L-Glutamine發(fā)狀分裂相關(guān)增強(qiáng)子-5抗體包裝25g
4β-羥基黃芪紫檀烷苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: N-Acetyl-L-Tyrosine磷化熱休克蛋白90α抗體包裝5g
5,7,4'-三羥基-8-基二氫黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Methyl orange磷化組蛋白H2AX抗體包裝100g
5,7-二羥基色原英文名稱: Disperse Orange 13磷化組蛋白H3抗體包裝25g
5-O-基維斯阿米-4'-O-β-D-呋喃芹糖基-...英文名稱: Acid Orange 74磷化組蛋白H3抗體包裝5g
5-O-基維斯阿米苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Crocein Orange G磷化組蛋白H3抗體包裝5g
5-羥基糠(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Isatin組蛋白去乙酰化5抗體包裝100g
5-羥色(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Nebivolol hydrochlorideA型流感病H5N1凝集包裝25g
5-羥色鹽鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Nebivolol hydrochloride人巨病UL49蛋白抗體包裝500g
6'''-阿魏酰斯皮諾英文名稱: Nuclear fast red肝核因子1β/HNF-1β抗體包裝1g
6''-O-二酰基染料木苷英文名稱: CarmineHHLA3蛋白抗體包裝25g
6''-二沙苑子苷單酯英文名稱: Bromophenol redHHIP樣蛋白2抗體包裝5g
產(chǎn)黃青霉Penicillium│chrysogenum 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR磷化肌球蛋白輕鏈試劑盒基橙皮苷;Methyl hesperi
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品磷化蛋白激C試劑盒京尼平;Genipin
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR磷化蛋白激B試劑盒伐侖克林;Varenicline
軟骨染色液(番紅O法)蟲類神食酵母 L-組氨酰-L-亮氨酸總糖Elisa
桔橙小單孢 4-硝基-1-萘還原糖Elisa
白鵝膏(不可訂購) 氯化亞鐵,無水激動Elisa
沃氏富鹽 氟化鈰二酰Elisa
相思根瘤 4-香豆酸Elisa
核盤 磷酸氫鈣 無水精氨酸激Elisa
巨獸芽孢桿 二乙氧基基硅烷赤霉4Elisa
尖孢鐮孢 乙酸柏木酯赤霉7Elisa
硝基還原假單胞 N-芐基-3-吡咯烷酮二氫玉米核苷Elisa
浙江芽孢桿 3-氧雜環(huán)丁肉桂脫氫Elisa
紫芝(紫靈芝,中華靈芝) 1-對甲苯磺酰基-3-硝基-1,2,4-三唑纖維Elisa
黃曲霉 1,3-二氯異喹啉1,5-二磷酸核酮糖Elisa
淡紫擬青霉 2-溴-5-甲生長釋放肽Elisa
猴頭 3-氯-4-吡啶螯合肽Elisa
冬蟲夏草 2-氨基-6-氟苯金屬忍耐蛋白Elisa