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詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Luminescent Cell Viability Assay Kit | 100次|500次 | 1～3天 |
商品介紹：
本試劑盒是一種通過化學發光法測定細胞內ATP含量從而來定量檢測活細胞數目的試劑盒。本試劑盒的性能和用途與Promega公司的同類產品基本相同，對于相同的細胞樣品本試劑盒的發光效果更強一些。 本試劑盒比常見的MTT、alamarBlue、Calcein-AM、WST-1、CCK-8等其它細胞活力測定方法更加簡單快捷。只需把試劑盒提供的檢測試劑與培養細胞等體積混合，反應10分鐘后即可進行化學發光檢測。無需洗滌細胞，也無需更換或去除培養液。并且化學發光非常穩定，在反應開始后的10分鐘內無顯著變化，30分鐘內的下降不超過10%。 本試劑盒不僅適合少量樣品的檢測，也非常適合大量樣品的高通量篩選檢測。 本試劑盒線性范圍廣，檢測靈敏度高。用96孔板進行檢測時，本試劑盒在0-50,000個細胞/孔的細胞密度范圍內有良好的檢測效果，并且在僅有幾百個細胞時仍有良好的線性關系。當細胞數量僅為50個/孔時，發光強度可達空白孔的5倍左右。 ATP，作為重要的能量分子，在細胞的各種生理、病理過程中起著重要作用。ATP是細胞新陳代謝的一個重要指標，也是具有代謝活性細胞的重要標志性分子，并和活細胞數目成良好的線性關系。因此，ATP含量能很好地反應活細胞的數目，即本試劑盒可以通過測定ATP含量來進行細胞計數或檢測細胞活力。 本試劑盒通過ATP檢測細胞活力的原理參考下圖。借助ATP依賴的螢光素酶催化的螢光素發光反應，ATP可以通過測定化學發光來進行定量。由于ATP含量能很好地反映活細胞的數目，而ATP含量和發光強度成正比，這樣就可以簡單地通過化學發光強度來計算出細胞活力或細胞數目。 細胞活力檢測試劑盒(化學發光法)檢測ATP的原理圖 對于96孔板，我們推薦使用100μl細胞培養液和100μl的檢測試劑，總體積為200μl，此時本試劑盒可以進行100次檢測。對于384孔板，我們推薦使用25μl細胞培養液和25μl的檢測試劑，總體積為50μl，此時本試劑盒可以進行400次檢測。也可以用其它體積的試劑進行檢測，但細胞培養液和檢測試劑體積的比例必須為1:1。 儲存條件：室溫，有效期2年。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)英文名稱：sRANKL ELISA Kit腺苷活化蛋白激γ3抗體包裝1g
可溶性Toll樣受體9(sTLR9/sCD289)英文名稱：sTLR9/sCD289 ELISA Kit腺苷單磷活化蛋白激β2抗體包裝25g
可溶性Toll樣受體4(sTLR4)英文名稱：sTLR4 ELISA Kit磷化周期末期促進復合蛋白APC1抗體包裝5g
可溶性Toll樣受體2(sTLR2)英文名稱：sTLR2 ELISA Kit周期末期促進復合蛋白APC1抗體包裝5g
可溶性P選擇(sP-selectin)英文名稱：sP-selectin ELISA Kit磷化蛋白激B2抗體包裝25g
可溶性Endoglin(ENG/sCD105)英文名稱：ENG/sCD105 ELISA Kit磷化鐵蛋白Fe65抗體包裝5g
可溶性CD86(B7-2/sCD86)英文名稱：B7-2/sCD86 ELISA Kit磷化鐵蛋白Fe65抗體包裝25g
可溶性CD40配體(sCD40L)英文名稱：sCD40L ELISA Kit磷化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體包裝5g
可溶性CD30配體(sCD30L)英文名稱：sCD30L ELISA Kit磷化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體包裝100ml
可溶性CD30(sCD30)英文名稱：sCD30 ELISA Kit磷化活化復制因子2抗體包裝500ml
顆粒B(Gzms-B)英文名稱：Gzms-B ELISA Kit磷化活化復制因子2抗體包裝5MG
顆粒A(Gzms-A)英文名稱：Gzms-A ELISA Kit磷化周期末期促進復合蛋白APC1抗體包裝1g
抗子宮內膜抗體(EMAb)英文名稱：EMAb ELISA Kit發育分化增強因子1抗體包裝100g
抗中性粒細胞核周抗體(pANCA)英文名稱：pANCA ELISA Kit磷化發育分化增強因子1抗體包裝25g
抗中性粒/中心體抗體(ACA)英文名稱：ACA ELISA Kit蛋白激B3包裝25ml
磷化通道蛋白2抗體C反應蛋白(CRP)Ruxolitinib phosphate (INCB018424 phosphate) 是一種有效的 JAK1/2 抑制劑， IC50 分別為3.3 nM/2
細胞活力檢測試劑盒(化學發光法)季也蒙邁耶氏酵母 3,5-二叔丁基苯酸膽堿酯酶檢測試劑盒
平田頭菇 4-BOC-哌-1-硫酰膽酸檢測試劑盒
釀酒酵母 (4-溴苯基)脲膽汁酸檢測試劑盒
短密木霉 4-氨基氮雜環庚烷-1-羧酸叔丁酯彈性蛋白檢測試劑盒
粘質沙雷氏 N-Cbz-L-苯氨酸彈性蛋白酶檢測試劑盒
枯草芽孢桿 4-氯-2,6-二氟蛋白(肽酰脯氨酰順;反異構酶)檢測試劑盒
白僵 2-溴-3-羥基苯甲蛋白C檢測試劑盒
黑曲霉 四氯鄰苯二蛋白S檢測試劑盒
糞腸球(糞鏈球) 1H-1,2,4-三氮唑-1-甲脒單鹽酸鹽蛋白Z檢測試劑盒
藤黃微球 3-甲氧基-2-甲苯蛋白Z依賴的蛋白酶抑制劑檢測試劑盒
枯草芽孢桿 硫酸鈦蛋白多糖檢測試劑盒
淺黃鏈霉 3-氯異喹啉蛋白激酶A檢測試劑盒
牛鏈球 蘭氏D群 2,3-二氟-4-溴蛋白激酶C檢測試劑盒
大腸埃希 6-溴-3H-異苯并呋喃-1-酮蛋白激酶C-β1檢測試劑盒
釀酒酵母 2-甲基-3-噻吩甲酸乙酯蛋白酪氨酸激酶檢測試劑盒
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