詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:JC-10熒光探針
英文名稱:JC-10
產品規格:1mg|5mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
JC-10是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位△Ψm的理想熒光探針。可以檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位。在線粒體膜電位較高時,JC-10聚集在線粒體的基質中,形成聚合物,可以產生紅色熒光;在線粒體膜電位較低時,JC-10不能聚集在線粒體的基質中,此時JC-10為單體,可以產生綠色熒光。這樣就可以非常方便地通過熒光顏色的轉變來檢測線粒體膜電位的變化。常用紅綠熒光的相對比例來衡量線粒體去極化的比例。激發波長Ex510nm,發射波長Em525nm。 線粒體膜電位的下降是細胞凋亡早期的一個標志性事件。通過JC-10從紅色熒光到綠色熒光的轉變可以很容易地檢測到細胞膜電位的下降,同時也可以用JC-10從紅色熒光到綠色熒光的轉變作為細胞凋亡早期的一個檢測指標。JC-10單體的大激發波長為515nm,大發射波長為529nm;JC-10聚合物的大激發波長為585nm,大發射波長為590nm。實際觀察時,使用常規的觀察紅色熒光和綠色熒光的設置即可。 儲存條件:-20℃干燥避光保存,保質期12個月。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
氧芐啶(標準品)英文名稱: Ketorolac分子伴侶復合體TCP-1β抗體包裝1g
氧普(標準品)英文名稱: Leflunomide分裂周期蛋白25C抗體包裝5g
異靛(標準品)英文名稱: Leflunomide過敏C4/補體C4抗體包裝1g
間基酚(標準品)英文名稱: Levofloxacin Hemihidrated脂肪結合蛋白3抗體包裝1g
間二酚(標準品)英文名稱: Levofloxacin Hemihidrated16號染色體開放閱讀框48抗體包裝250mg
間酚(標準品)英文名稱: Lornoxicam色P450 19抗體包裝25g
間羥基(標準品)英文名稱: LornoxicamCD28抗體包裝5g
交沙霉(標準品)英文名稱: Losartan Potassium1號染色體開放閱讀框195抗體包裝1ml
金O(標準品)英文名稱: Losartan PotassiumNK抑制性受體2DL1抗體包裝25ml
金橙II(標準品)英文名稱: Masitinib3號染色體開放閱讀框67抗體包裝5ml
金剛烷(標準品)英文名稱: Mecillinamκ-酪蛋白抗體包裝1g
金諾芬(標準品)英文名稱: Medroxyprogesterone 唾液結合性免疫球蛋白樣凝集7抗體包裝25g
伐倫克林(標準品)英文名稱: Medroxyprogesterone Cappuccino蛋白抗體包裝5g
羅格列(標準品)英文名稱: Methimazole前列腺過氧化物合成3抗體包裝1g
美托洛爾(標準品)英文名稱: Methimazole補體因子H相關蛋白1抗體包裝250mg
無乳鏈球菌 蘭氏B群Streptococcus│agalactiae 質量規格:HPLC>99%,標準品腺病IgM試劑盒甜菊雙糖苷;Steviolbioside
條紋擬盤多毛孢Pestalotiopsis│virgatula 質量規格:≥900μg/mg,USP33,BR腺病IgG試劑盒匙羹藤I;GyMneMic acid
韓國假單胞菌Pseudomonas│koreensis 質量規格:效價測定腺病36抗體試劑盒脫氧;Deoxyaconitine
JC-10熒光探針米曲霉 4-溴-9,9'-螺二芴抗RA33IgG抗體Elisa
Bacillus tequilensis Nα-對甲苯磺酰-L-精氨酸半胱氨酸蛋白10Elisa
科氏葡萄球科氏亞種 2,2-雙(4-氧苯基)烷基質金屬蛋白9Elisa
水生哈薩克斯坦酵母 5,6,7,7a-四氫噻吩并[3,2-c]吡啶-2(4H)-酮鹽酸鹽碳酸酐Elisa
美味牛肝 α-(4-基)二苯甲絲氨酸脫水Elisa
大腸埃希氏 利賽膦酸鈉抗膜聯蛋白A5抗體Elisa
爪哇根霉 N-Cbz-L-蛋氨酸抗磷脂酰乙抗體Elisa
鏈格孢 3-羥基-3-甲基-2-丁酮蛋白S抗體Elisa
枯草芽胞桿 3,4-二氟苯甲蛋白C抗體Elisa
囊毛霉 4-(二甲基氨基)苯酸鹽酸鹽抗波形蛋白抗體Elisa
枯草芽孢桿 4-溴-2-氟β2糖蛋白抗體Elisa
金白F4(金針菇) 4-溴-2-氟-芐泛化蛋白Elisa
美澳型核果褐腐病 Boc-L-2,4-二氯苯氨酸載脂蛋白FElisa
季也蒙邁耶氏酵母 N-(叔丁氧羰基)-3-氟-L-苯氨酸γ-谷氨酰基轉氨5Elisa
嗜熱脂肪芽胞桿 D-2,4-二氯苯氨酸烯酰水合1Elisa