活細(xì)胞染色液(Hoechst 33342)(100×)公司*的產(chǎn)品：phospho-ATR/ACTR(Ser428) 化ATR抗體羥酰 98%
ATP7B 銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)β鏈抗體三油甘油酯 99%
ATP1b2/Na+K+ATPase 鈉ATP酶通道蛋白抗體戊二酰 97%
Phospho-Na,K-ATPase alpha-1 (Tyr10) 化鈉ATP酶蛋白a1抗體甘草次（α型） 分

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：活細(xì)胞染色液(Hoechst 33342)(100×)

英文名稱：Hoechst 33342 Living Cell Staining Solution

產(chǎn)品規(guī)格：0.1ml|0.5ml|3ml

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

酪羥化(TH)英文名稱：TH ELISA Kit過氧化物酰基氧化2抗體包裝25g

跨膜蛋白97(TMEM97/MAC30)英文名稱：TMEM97/MAC30 ELISA Kit膽固酰基轉(zhuǎn)移1抗體包裝5g

克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16)英文名稱：CC16 ELISA Kit磷化間變型淋巴瘤激抗體包裝1g

可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)英文名稱：sTRAIL ELISA Kit磷化ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白2抗體包裝5g

可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)英文名稱：sPECAM-1/sCD31 ELISA Kit磷化有絲分裂激B/C抗體包裝1g

可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白(sTM)英文名稱：sTM ELISA Kit磷化腺泡Acinus蛋白抗體包裝25g

可溶性血凝樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)英文名稱：sLOX-1 ELISA Kit磷化腎上腺能受體β2抗體包裝5g

可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)英文名稱：sEPCR ELISA KitAPS抗體包裝25g

可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體1(sVEGF R1/sFlt1)英文名稱：sVEGF R1/sFlt1 ELISA Kit激活受體樣激1抗體包裝5g

可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)英文名稱：sICAM-1 ELISA Kit激活A(yù)受體1B抗體包裝100ml

可溶性髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(sTREM-1)英文名稱：sTREM-1 ELISA Kit磷化雄激受體抗體包裝25ml

可溶性瘦受體(sLR)英文名稱：sLR ELISA Kit磷化A-Raf抗體包裝5ml

可溶性凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)英文名稱：sLOX-1 ELISA Kit酰基鞘脫酰2抗體包裝100ml

可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)英文名稱：sMHC-2 ELISA Kit脂肪特異性粘附分子抗體包裝1g

可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)英文名稱：sMHC-1 ELISA Kit腺相關(guān)病5抗體包裝5g

雙調(diào)蛋白（結(jié)腸直腸源性生長因子）抗體C反應(yīng)蛋白(CRP)Pictilisib (GDC-0941) is a potent inhibitor of PI3Kα/δ with IC50 of 3 nM in cell
活細(xì)胞染色液(Hoechst 33342)(100×)小叢殼屬 N-叔丁氧羰基-S-(4-)-D-青霉二環(huán)己基促性腺平抑因子檢測試劑盒

類谷糠乳桿 2,6-二氯苯甲促胰液素檢測試劑盒

大豆慢生根瘤 2,3-二氯茴香催產(chǎn)素檢測試劑盒

產(chǎn)氣莢膜梭 素C型 2-氨基-3-甲基吡催乳素檢測試劑盒

土生類諾卡氏 5-硝基吡唑-3-羧酸大內(nèi)皮素檢測試劑盒

樟疫霉 3′-溴苯酮單氧化酶檢測試劑盒

黃色長孢鏈霉 1,14-十四烷二單純皰疹病抗原2檢測試劑盒

果生鏈核盤 6-氯喹唑啉-4-單核趨化蛋白1檢測試劑盒

地衣芽孢桿 4-(3-溴苯基)嗎啉單核趨化蛋白3檢測試劑盒

白金針菇 4-(3-溴苯基)嗎啉單核趨化蛋白5檢測試劑盒

大腸埃希氏 3-氟-N-單抗MG7相關(guān)抗原檢測試劑盒

白黃側(cè)耳 2-氟-6-甲酸甲酯單鏈DNA結(jié)合蛋白檢測試劑盒

微小桿 1,6-萘啶-2-羧酸膽固檢測試劑盒

蘇云金芽孢桿 3-氨基-4-羧基乙氧基吡唑膽固酯檢測試劑盒

藤黃類諾卡氏 2,5-二氯吡膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶檢測試劑盒 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)