詳細介紹
商品介紹:
用途: 顯示細胞中堿性蛋白,尤其是組蛋白 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:酸性固綠染色液
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:2×50ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
紫檀芪(標準品)英文名稱: Angiotensin III,human 癌高表達蛋白Hec1抗體包裝5g
紫檀香(標準品)英文名稱: Apamin 磷化荷爾蒙敏感脂肪抗體包裝1g
紫菀(標準品)英文名稱: Clomiphene citrate組蛋白去乙酰化1抗體包裝1g
紫菀(標準品)英文名稱: SR3335;ML176半乳糖基轉(zhuǎn)移2抗體包裝5g
紫云英苷(標準品)英文名稱: SU5416 磷化異染色質(zhì)蛋白1抗體(果蠅)包裝1g
自然銅(醋煅)(標準品)英文名稱: Milbemycin oxime異染色質(zhì)蛋白1磷化抗體(果蠅)包裝5g
棕櫚(標準品)英文名稱: Valdecoxib缺氧誘導(dǎo)因子2α /HIF-2α抗體包裝100g
棕矢車菊(標準品)英文名稱: Gastrin I,human 型流感病M2抗體包裝25g
走馬胎(標準品)英文名稱: Uridine 5'-diphosphoglucuronic acid trisodium salt熱休克蛋白-47抗體包裝5g
祖師麻(唐古特瑞香)(標準品)英文名稱: Ticarcillin disodium salt人類狀瘤病16抗體包裝25mg
鉆山風(標準品)英文名稱: Ticarcillin disodium salt缺氧誘導(dǎo)因子1α 抗體HIF-1α包裝25g
醉椒英文名稱: Arg-Gly-Asp 組蛋白H3抗體包裝5g
醉魚草皂苷IVb(標準品)英文名稱: Heparin lithium人類皰疹病8抗體/皰疹病8型包裝100g
多巴(標準品)英文名稱: Secretin Acetate人類巨病抗體包裝25g
左旋樟腦(標準品)英文名稱: Thymol人類皰疹病8抗體包裝5g
醬油曲霉Aspergillus│sojae 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,可用于培養(yǎng)磷脂轉(zhuǎn)運蛋白試劑盒基當藥寧;Methylswertian
巨大芽孢桿菌Bacillus│megaterium de Bary 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%標準品磷脂轉(zhuǎn)移蛋白β試劑盒7-O-基白楊;7-O-Methyl
: 43476資源名稱: 偶發(fā)分枝桿菌偶發(fā)亞種 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR磷脂酰乙試劑盒巨大戟; Ingenol
酸性固綠染色液多主葡萄殼 (2S,3aS,7aS)-八氫-2-羧酸抗氧化Elisa
根瘤 5-溴-2-甲氧基苯甲法尼基焦磷酸合Elisa
松生擬層孔 2,3,6,7,10,11-六甲氧基三亞苯角鯊烯單加氧;鯊烯環(huán)氧Elisa
Stenotrophomonas rhizophila AE-活性酯β-香樹脂合成Elisa
玫瑰考克氏 Nω-(4-甲氧基-2,3,6-三磺酰基)-L氨酸鯊烯合Elisa
菜豆根瘤 BOC-L-3,4-二氯苯氨酸抗性淀粉Elisa
巨孢鏈霉 (S)-(+)-6,6'-二溴-1,1'-聯(lián)-2-萘酚植酸Elisa
短柄帚霉 木質(zhì)磺酸鈣原花青Elisa
玉米大斑病 4-氟-2-生長Elisa
糞腸球 甲氧基聚乙二麥芽糖Elisa
屎腸球 甲氧基聚乙二ATP合成Elisa
檸條根瘤 甲氧基聚乙二漆Elisa
畢赤酵母 甲氧基聚乙二類黃酮Elisa
Escherichia 3,5-二甲基異噁唑-4-磺酰(基)氯乙烯合成Elisa
浸麻類芽孢桿 4-氨苯基酸鹽酸鹽乙烯氧化Elisa