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詳細介紹
商品介紹：
本試劑盒適用于測定哺乳動物組織、細胞caspase-1活性。測定原理基于Caspase-1特異水解其多肽底物N-acetyl-Tyr-Val-Ala-Asp-pNA(Ac-YVAD-pNA)，釋放出游離的硝基pNA，后者呈黃色在405nm具有大吸收峰，用可見光分光光度比色方法測定。其吸光度值對應于Caspase-1的水解活性。 細胞凋亡屬于程序化細胞死亡，可見于各種器官和細胞，在正常發育、生理、病理過程中對細胞和器官的穩態具有十分重要的調節作用。Caspase(Cysteine-requiring Aspartate Protease)是參與細胞凋亡過程的蛋白酶家族，包含10多個成員。其中Caspase-1是可剪切IL-1b和IL-18前體產生活性細胞因子的caspase。Caspase-11剪切45kD的caspase-1前體蛋白產生20kD和10kD片斷，這兩個片斷可以形成異源二聚體，并進一步形成四聚體。此四聚體具有蛋白酶活性。Caspase-1通過剪切Bcl-XL調節細胞凋亡，并通過對細胞因子前體的剪切來調控相關細胞因子介導的免疫炎性反應。 運輸及保存：試劑常溫運輸。到達后按要求儲存，1年內穩定。 所需儀器：酶標儀與96孔酶標板；或可見光分光光度計配100μl容積的石英比色杯。 工作波長：大吸收波長405nm，如不具備也可在400～450nm范圍內測定，但靈敏度略降。 |
產品屬性：
中文名稱：Caspase-1活性測定試劑盒
英文名稱：Caspase 1 Activity colorimetric assay Kit
產品規格：20T|50T|100T
發貨周期：1～3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調控；
⑤細胞分化及其調控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
蝶呤（標準品）英文名稱： Fluoxetine Hydrochloride8號染色體開放閱讀框4抗體包裝100g
蝶呤二鈉鹽 (標準品)英文名稱： Fluvoxamine maleateCD73抗體包裝25g
磺丁脲(標準品)英文名稱： Fluvoxamine maleate軸突相關粘附分子抗體包裝500g
咪唑英文名稱： Formestane6型膠原蛋白α5抗體包裝1g
咪唑（標準品)英文名稱： Formestane神經粘附分子CALL抗體包裝5g
芬那（標準品）英文名稱： Fosinopril sodium中性粒殺菌蛋白BP30抗體包裝100ml
砜霉（標準品）英文名稱： Furosemide21號染色體開放閱讀框56抗體包裝500ml
鈷（標準品）英文名稱： FurosemideT淋巴CD1抗體包裝50ml
磺地平（標準品）英文名稱： Gemfibrozil角蛋白5抗體包裝100g
磺倍他司汀（標準品）英文名稱： Gemfibrozil補體C9a抗體包裝25g
磺達沙星(標準品)英文名稱： Gliclazide20號染色體開放閱讀框141抗體包裝1g
磺多拉司瓊(標準品)英文名稱： Gliclazide20號染色體開放閱讀框160抗體包裝5g
磺多沙唑（標準品）英文名稱： Glyburide/Gliebenclamide親環蛋白（親環）40抗體包裝100g
磺酚妥拉明（標準品）英文名稱： Glyburide/GliebenclamideT調控相關蛋白抗體包裝25g
磺吉米沙星（標準品）英文名稱： Glimepiride突觸后蛋白CRIPT抗體包裝5g
白靈側耳（白靈菇）Pleurotus│nebrodensis 質量規格：HPLC>98%,標準品相撲結合UBC9試劑盒無檸檬;Citric acid
季也蒙畢赤酵母Pichia│guilliermondii 質量規格：干品純度≥90.0%，干品含量≥85.0%，USP34腺嘌呤核苷轉運蛋白試劑盒文多靈;Vindoline
pTargetFpTargetF 質量規格：含量測定腺苷脫試劑盒五味子;Schisandrin
Caspase-1活性測定試劑盒北方蜜環 美拉諾坦半胱氨酸蛋白9Elisa
釀酒酵母 17-AAG載脂蛋白E2Elisa
鏈霉 3-氯-4-氟苯甲糖類抗原Elisa
白地霉 Bovine adrenal medulla dodecapeptide血小板衍生生長因子AAElisa
天藍褐鏈霉 4-氟-3-硝基氯芐真核翻譯起始因子4E結合蛋白1Elisa
釀酒酵母 2-甲氧基-3-連接橋粒斑珠蛋白Elisa
大腸埃希 Regorafenib (BAY 73-4506)抗鏈球溶血0Elisa
膠孢 [Arg8]-Vasotocin acetate saltF肌動蛋白Elisa
pET-23a NVP-AUY922Talin-1Elisa
馬賽 2-甲氧基-3-硝基吡啶δ-維生EElisa
堅強芽孢桿 雙(2-甲氧乙基)氨基三氟化硫（BAST）γ-維生EElisa
擬雷氏日歸殼 1H-1,2,3-三氮唑-4-鹽酸鹽α-維生EElisa
陰溝腸桿 3,5-二氯-2-硝苯β-胡蘿卜Elisa
腸膜明串珠 -氟-4-甲基-5-硝苯黃體生成釋放Elisa
圓弧青霉 2-氯-3-氟-4-羥基吡啶溶體相關膜蛋白2抗體Elisa
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