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詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調控；
⑤細胞分化及其調控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
產品屬性：
中文名稱：細胞凋亡檢測試劑盒I(POD)
英文名稱：
產品規格：20T
發貨周期：1～3天
商品介紹：
工作原理： 在機體內部隨時都在發生著細胞的死亡。傳統上用顯微鏡來觀察細胞的死亡，其特征為核染色質的濃縮及碎片的形成。但是這種現象出現的很晚，時間也很短暫。凋亡的特征是內源性核酸內切酶被激活，細胞自身的染色質或DNA被切割，出現單鏈或雙鏈缺口，并產生與 DNA 斷點數目相同的3’-OH末端。末端脫氧核糖核酸轉移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以將標記的dUTP(DIG-dUTP)標記至 3’-OH末端，DIG-dUTP結合在DNA斷點部位，可以通過生物標記的抗抗體(Anti-DIG-Biotin)反應后，再結合鏈酶親和素-過氧化物酶(SABC)，然后加入顯色底物DAB予以顯示。凋亡的細包核呈黃色，從而可以在顯微鏡下觀察到著色的凋亡細胞。 試劑盒內容： 1．標記緩沖液(Labeling Buffer)1ml 2．末端脫氧核糖核酸轉移酶(TdT,×20)20μl 3．DIG-dUTP(×20)20μl 4．封閉液(Blocking Reagent)4ml 5．生物素化抗抗體(× 100)20μl 6．SABC(× 100)20μl 7．Proteinase K(×200)50μl 8．抗體稀釋液 4ml 保存條件：-20℃冰凍保存。 保存期：一年 |
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
基質金屬蛋白10(MMP10)英文名稱：MMP10 ELISA Kit7號染色體開放閱讀框59抗體包裝5MG
基質金屬蛋白1(MMP1)英文名稱：MMP1 ELISA Kit7號染色體開放閱讀框64抗體包裝250mg
肌原纖蛋白1(FBN1)英文名稱：FBN1 ELISA Kit8號染色體開放閱讀框12抗體包裝1g
肌營養不良蛋白關聯糖蛋白1(DAG1)英文名稱：DAG1 ELISA Kit8號染色體開放閱讀框31抗體包裝250mg
肌營養不良蛋白(DMD)英文名稱：DMD ELISA Kit8號染色體開放閱讀框33抗體包裝5g
肌細胞生成(MYOG)英文名稱：MYOG ELISA KitⅡ型膠原蛋白抗體包裝100g
肌微管相關蛋白9(MTMR9)英文名稱：MTMR9 ELISA Kit軟骨蛋白1抗體包裝25g
肌肽合1(CARNS1)英文名稱：CARNS1 ELISA Kit顱面部發育蛋白1抗體包裝500g
肌激MB同工(CKMB)英文名稱：CKMB ELISA Kit肥大羧肽A3抗體包裝1g
肌肉生長抑制(MSTN)英文名稱：MSTN ELISA Kit1號染色體開放閱讀框105抗體包裝250mg
肌球蛋白重鏈4(MYH4)英文名稱：MYH4 ELISA KitⅠ型補體受體抗體（C3b/C4b受體抗體）包裝5g
肌球蛋白重鏈2(MYH2)英文名稱：MYH2 ELISA Kit趨化樣因子受體1抗體包裝1g
肌球蛋白重鏈1(MYH1)英文名稱：MYH1 ELISA Kit趨化樣因子受體1抗體包裝1g
肌球蛋白ⅤA(MYO5A)英文名稱：MYO5A ELISA Kit磷化β-連環蛋白/β-連環/β鏈接抗體包裝1g
肌球蛋白ⅠA(MYO1A)英文名稱：MYO1A ELISA Kit磷化β-連環蛋白/β-連環/β鏈接抗體包裝250mg
銅綠假單胞菌Pseudomonas│aeruginosa 質量規格：HPLC>98%,標準品整合αM型試劑盒魚藤;Rotenone
東京根霉Rhizopus│tonkinensis 質量規格：進分Sigma P4394 整合αⅤβ3試劑盒異銀杏雙黃;Isoginkgetin
云芝栓孔菌Trametes│versicolor (L.) Lloyd 質量規格：>98.5%,培養級,BR整合α4試劑盒異丁酰紫草;Isobutyrylshi
細胞凋亡檢測試劑盒I(POD)釀酒酵母 十八酰轉酮Elisa
單色下皮黑孔 2-氯-4-氟-5-轉移因子Elisa
大腸埃希氏桿 二乙烯三五乙酸鐵-鈉絡合物自然殺傷Elisa
類芽孢桿屬 葡萄糖酸亞鐵鹽自噬基因Beclin 1Elisa
迪氏野野村氏 2,6-二氟對甲氧基苯總UL16結合蛋白Elisa
枯草芽孢桿 2-庚總β淀粉樣蛋白Elisa
構巢曲霉 己二酸二辛酯總膽紅Elisa
惡臭假單胞 萘1,3,6-三磺酸三鈉鹽水合物總膽汁酸Elisa
Bacillus tequilensis 2-溴-7-芴總蛋白Elisa
環狀芽胞桿 壬酸乙酯總甲狀腺Elisa
球孢鏈霉 乙氧基亞甲基二總抗氧化能力Elisa
禽腺病Ⅷ型 對二乙氧基苯總肉堿Elisa
粉紅聚端孢霉 甲酸對甲氧芐酯總鐵結合力Elisa
產黃青霉 鹽酸伊托必利足標記蛋白;足盂蛋白Elisa
新城疫病 磺酰唑草酮阻抑Elisa
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