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乳酸脫氫酶染色液(四唑鹽法)

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更新時(shí)間:2022-04-24 11:22:23瀏覽次數(shù):226

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 2×50ml
貨號(hào) GOY-01X10023 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
乳酸脫氫酶染色液(四唑鹽法)公司*的產(chǎn)品:Phospho-Cyclin D1 (Thr286) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化cyclin D1抗體IgG氟化鈣 光譜純
Cyclin D2/FITC 熒光標(biāo)記周期D2抗體IgG化銫 SP
Cyclin D3/FITC 熒光標(biāo)記周期D3抗體IgG三氧化二鈷 SP
Cyclin E/FITC 熒光標(biāo)記周期E/原癌因抗體IgG三氧化

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

中文名稱(chēng):乳酸脫氫酶染色液(四唑鹽法)

英文名稱(chēng):

產(chǎn)品規(guī)格:2×50ml

發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹:

用途:

乳酸脫氫酶染色

注意事項(xiàng):

主要由四氮唑藍(lán)孵育液、陰性對(duì)照組成。染色后酶活性部位呈藍(lán)紫色沉淀。

儲(chǔ)存條件:4℃,避光,6個(gè)月

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;

②生物膜與細(xì)胞器的研究;

③細(xì)胞骨架體系的研究;

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。

牡丹皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Saikosaponin B2珠蛋白1抗體包裝100ml

牡丹皮苷C英文名稱(chēng): Saikosaponin C肌球蛋白輕鏈9抗體包裝25ml

牡荊(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Saikosaponian D磷化肌球蛋白輕鏈9抗體包裝1g

牡荊-4''-O-葡萄糖苷英文名稱(chēng): HederageninNADH復(fù)合體1抗體包裝5g

牡荊葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Hederagenin癌相關(guān)抗原抗體包裝100g

牡荊鼠李糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Epimedin A組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移MOF抗體包裝25g

木鱉子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Epimedin A1間質(zhì)蛋白抗體包裝10g

木芙蓉葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Epimedin B肌球蛋白輕鏈3抗體包裝100g

木瓜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Epmedin C多藥耐藥蛋白/P-糖蛋白抗體包裝25g

木蝴蝶苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Aurantio-obtusin同源結(jié)構(gòu)蛋白1抗體包裝5g

木蝴蝶苷B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Hesperidin增殖誘導(dǎo)蛋白5/肺癌相關(guān)蛋白10抗體包裝1g

木蘭花堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Hesperidin肌鈀蛋白抗體包裝5g

木蘭花堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Hesperitin肌管相關(guān)蛋白2抗體包裝25g

木蘭脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Cordycepin基質(zhì)金屬蛋白18/19抗體包裝10g

木棉花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Nobiletin增殖相關(guān)蛋白MAGOH抗體包裝250g

JCM9420=ATCC51300=DSM44048=IFO15854=IMSNU資源名稱(chēng): 盧森坦類(lèi)諾卡氏菌 質(zhì)量規(guī)格:>97%,游離抗膠原蛋白抗體試劑盒扁豆堿;PhysostigMine

康寧木霉Trichoderma│konigii 質(zhì)量規(guī)格:BS生物染色級(jí)抗?fàn)钕傥⒘sw抗體試劑盒冬凌草乙;Ponicidin

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:BS抗?fàn)钕偾虻鞍卓贵w試劑盒多烯紫杉;Docetaxel
乳酸脫氫酶染色液(四唑鹽法)產(chǎn)氨短桿 6-叔丁基-3H-噻吩[2,3-D]嘧啶-4-酮III型前膠原Elisa

 4-異基苯乙IV型膠原Elisa

華特拉根瘤 4-異基苯I型膠原Elisa

芽胞桿 Fmoc-L-羥脯氨酸芐酯I型前膠原Elisa

蠟樣芽孢桿 肉桂基溴I型前膠原羧基端肽Elisa

馬泰勒蟲(chóng)(青海剛察株) 七甲基壬烷I型前膠原N端前肽Elisa

枯草芽孢桿 還原橙 3L-谷氨酸脫氫Elisa

牛瘟病 2-(甲基)喹啉N2乙酰受體IgGElisa

副結(jié)核補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)(-)陰性血清 3-苯基-5-氨基異噁唑N2乙酰受體IgG1Elisa

土壤短芽胞桿 3-溴-5-(三氟甲基)吡啶N2乙酰受體IgG2Elisa

琥珀乳牛肝 3,4,5-三苯酸Na-K-ATPElisa

大腸埃希 5-溴-2-茚滿(mǎn)N端前腦鈉Elisa

干酪乳桿 1-烯基-3-甲基咪唑六氟磷酸鹽N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷Elisa

貝萊斯芽胞桿 3-氟-5--4-甲酸骨膜蛋白Elisa

灰離褶傘 非洛地平Phospho (637)-DRP1Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

 


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