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堿性蛋白染色液(細(xì)胞專用)

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更新時間:2022-04-24 09:19:26瀏覽次數(shù):246

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 2×50ml
貨號 GOY-01X9934 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
堿性蛋白染色液(細(xì)胞專用)公司*的產(chǎn)品:A/H1N1-M2 Human/Gold 膠體金標(biāo)記兔抗人A型流感病H1N1-M2抗體IgGN-羥酰神經(jīng)氨 ≥95% (HPLC)
AIMP2/JTV1/FITC 熒光標(biāo)記抗AIMP2抗體IgG碳鋰 AR,99.5%
AK-1/FITC 熒光標(biāo)記腺苷激-1抗體IgG無水醋鋰 99.9%
ADK/adenylate kinase/FITC 熒

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

中文名稱:堿性蛋白染色液(細(xì)胞專用)

英文名稱:

產(chǎn)品規(guī)格:2×50ml

發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹:

用途:

顯示細(xì)胞中堿性蛋白,尤其是組蛋白

注意事項(xiàng):

細(xì)胞核大部分被染成綠色。

儲存條件:室溫,避光,12個月

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;

②生物膜與細(xì)胞器的研究;

③細(xì)胞骨架體系的研究;

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

止瀉木子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: H-Pyr-OH人內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病膜糖蛋白2抗體包裝5g

枳殼(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Z-Pyr-OHBeta基己糖苷beta亞基蛋白B鏈抗體包裝1g

枳實(shí)(橙)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DL-m-TyrosineHEXIM2蛋白抗體包裝250mg

制何首烏(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: H-Sar-OMe·HCl3'-5'外切1蛋白抗體包裝10g

腫節(jié)風(fēng)(草珊瑚)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Isoleucinol型肝炎病NS5B抗體包裝100g

重樓(云南重樓)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Leucinol缺氧誘導(dǎo)基因1C蛋白抗體包裝25g

重樓皂苷II(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Boc-LeucinolHEG同源蛋白1抗體包裝500g

重樓皂苷I(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Phenylalaninol人腫瘤抑制蛋白抗體包裝1g

重樓皂苷VII(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-TryptophanolHemk基轉(zhuǎn)移家族1號蛋白抗體包裝5g

重樓皂苷VI(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fmoc-ValinolHemk基轉(zhuǎn)移家族2號蛋白抗體包裝1g

珠子草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: D-ValinolHEN1基轉(zhuǎn)移同源蛋白1抗體包裝250mg

豬膽粉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Phenylglycinol缺氧誘導(dǎo)基因2蛋白抗體包裝5g

豬苓C英文名稱: BOC-L-Prolinol乙肝病衣殼蛋白抗體包裝25g

豬去氧膽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2-Amino-1,3-propanediol 型肝炎病1a基因型NS5蛋白抗體包裝5g

豬牙皂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: N-Methyl-d-Aspartic Acid戊型肝炎病抗體包裝50g

鮑曼/醋鈣復(fù)合不動桿菌Acinetobacter│baunannii/calcoaceticus complex 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品流感B病試劑盒10-氧基;10-Methoxy

青霉屬Penicillium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR流感B病試劑盒基丁香酚;Methyl eugenol

暫無Haematobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品流感A病抗體IgG 巨豆三烯;Tabanone
堿性蛋白染色液(細(xì)胞專用)稻梨孢 香蘭基丁羽狀斑駁病Elisa

赤霉 Raloxifene HCl輕型黃邊病Elisa

核黃德沃斯氏 鹽酸喹那普利烯酰-CoA水合Elisa

豇豆慢生根瘤 Fmoc-L-4-苯氨酸淀粉Elisa

蘇云金芽孢桿 2-氨基-6-溴嘌呤NAD-蘋果酸Elisa

土壤伯克氏 1-O-癸基-β-D-麥芽糖苷NADP-蘋果酸Elisa

黑曲霉 3-氯-5-甲氧基碳酸酐βElisa

亮白曲霉 3-甲基氨酸氨基轉(zhuǎn)移Elisa

黃曲霉 4-(2-三氟氧基)天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移Elisa

黃色毛霉 (R,R)-(+)-雙(α-甲芐基)鹽酸鹽L(+)-3-羥脂酰脫氫Elisa

小紅酵母 基環(huán)三氧烷NADP-依賴蘋果酸脫氫Elisa

香栓 2-氯-5-(三氟甲基)苯甲脫鎂葉綠AElisa

少根根霉原變種 糖精鈉 水合物7-羥基Elisa

芽孢桿 7,7-二氯二環(huán)[4.1.0]庚烷Elisa

枯草芽孢桿 3-溴4-氯苯蘋果酸脫氫Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

 


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