詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:微絲染色液(R250法)
英文名稱:
產品規格:5×20ml|5×50ml
發貨周期:1~3天
商品介紹:
用途: 主要顯示由微絲構成的應力纖維,由于細胞對細胞基質的附著和維持扁平鋪展的形狀,該纖維在體外培養的貼壁細胞中尤其發達。 注意事項: 微絲染色液在染色過程中由于微觀結構不穩定,有些纖維在光學顯微鏡下無法辨認,因此能夠看到的纖維主要是由微絲組成的應力纖維。 儲存條件:4℃,避光,12個月 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
鷓鴣菜(標準品)英文名稱: DL-Alanyl-DL-norvalineHERC4 E3泛蛋白連接抗體包裝250mg
珍珠(標準品)英文名稱: 3-(1-Naphthyl)-L-alanineHERC6 E3泛蛋白連接抗體包裝5g
珍珠母(標準品)英文名稱: Fmoc-3-(2-Naphthyl)-D-alanineMMF誘導片段蛋白1抗體包裝1g
正丁基酞;丁基酞內酯(標準品)英文名稱: L-Citrulline HERPUD蛋白家族成員2抗體包裝25g
正二十九烷英文名稱: Fmoc-L-Citrulline尿黑氧化抗體包裝5g
芝麻林(標準品)英文名稱: Boc-L-β-homoalanine肝生長調節因子酪激底物抗體包裝1g
芝麻(標準品)英文名稱: Boc-L-?-homoaspartic acid 5-benzyl esterT2識別黑色瘤抗原抗體包裝250mg
知母(標準品)英文名稱: Fmoc-β-homoaspartic acid肝癌HHCM蛋白抗體包裝5g
知母皂苷A1英文名稱: Fmoc-L-β-Homoglutamic acid 6-tert-butyl ester紫外切除修復蛋白RAD23A抗體包裝1g
知母皂苷A3(標準品)英文名稱: H-HomoArg-OH紫外切除修復蛋白RAD23B抗體包裝250mg
知母皂苷BII(標準品)英文名稱: L-Hydroxyproline3-羥基異丁脫氫抗體包裝100g
知母皂苷E(標準品)英文名稱: L-HydroxyprolineHib乙酰解抗體包裝25g
梔子(標準品)英文名稱: L-Norleucine腫瘤異常基化蛋白1抗體包裝500g
蜘蛛香(標準品)英文名稱: Fmoc-4-iodo-D-Phe-OH腫瘤異常基化蛋白2抗體包裝25mg
植(標準品)英文名稱: 3,5-Diiodo-L-tyrosine缺氧誘導因子脯酰羥化4抗體包裝1g
乳乳球菌Lactococcus lactis 質量規格:>98.5%,BR,可用于培養流行性腦脊髓膜炎抗體試劑盒金合歡;Acacetin
克雷伯氏菌Klebsiella│sp. 質量規格:HPLC>98%,標準品流感病抗體IgG試劑盒;D(-)-Tartaric ac
乳乳球菌Lactococcus│lactis 質量規格:>98%流感B病抗體IgG ;Formic acid
微絲染色液(R250法)圍小叢殼扁圓變種 1-Boc-4-甲酸壁降解Elisa
栗疫 BOC-D-脯氨色Elisa
新城疫病 2,4,6-氧基苯甲半纖維Elisa
尖鐮孢古巴專化型 2,4-二氯-5-氟查爾酮合成Elisa
玫瑰色紅球 三硫酮脂肪氧化Elisa
運動節桿 (S)-3-氨基-3-苯基油菜內酯Elisa
Rhizobium multihospitium 2--3-吡啶總酚Elisa
黑曲霉 2-乙烯基萘生物堿Elisa
產氣莢膜梭 D型 5-氟-2-(三氟甲基)苯葡萄糖氧化Elisa
隆紋黑蛋巢 N-[(S)-(+)-1-(乙氧羰基)-3-苯基]-L-氨酸糞卟啉原ⅢElisa
Rhizobium alkalisoli 5-氯-3-甲熱休克蛋白70Elisa
節桿 N-乙基-N-(2-羥基-3-磺基)-3,5-二鈉鹽(MAOS)熱休克轉錄因子Elisa
所多瑪鹽紅 N-乙基-N-(2-羥基-3-磺基)-3-甲氧基苯鈉鹽二水合物雪花蓮凝集Elisa
山梨木糖假絲酵母 BOC-L-色氨游離蛋白Elisa
陽還原地桿 NA-酸酐有機磷Elisa