詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:kFluor555-EdU法細胞增殖檢測試劑盒(流式)
英文名稱:
產品規格:10T|20T|50T
發貨周期:1~3天
商品介紹:
kFlour555 Click-iT EdU 流式檢測試劑盒,細胞增殖檢測是評估細胞健康程度、遺傳毒性及抗腫瘤藥物效果的基礎實驗手段。精確的檢測細胞增殖方法是BrdU法。EdU法檢測試劑盒是brdu方法的革命性突破。EdU(5-溴-2-脫氧尿嘧啶)試劑盒是一種嘧啶類似物,可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。EdU法檢測是基于“點擊"反應,一種由銅催化的疊氮化合物和炔烴的原子共價反應。本試劑盒中,EdU試劑含有炔烴,而kFlour555染料試劑含有疊氮化合物。點擊法的EdU標記增殖快速有效,易于使用。只需少量的疊氮化染料即可非常有效地標記出整合的EdU。標準化的固定和去污劑促滲可以使檢測試劑進入細胞,而brdu方法則需要DNA變性(如酸變性、熱變性或者用Dnase消化)去暴露BrdU,從而方便BrdU抗體結合。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
無孢蛋白(ASPN)英文名稱:ASPN ELISA Kit色c氧化1抗體包裝25ml
吻受體(KISS1R)英文名稱:KISS1R ELISA Kit表面趨化因子受體4相關蛋白4抗體包裝5ml
吻1(KISS1)英文名稱:KISS1 ELISA Kit表面趨化因子受體4相關蛋白6抗體包裝1g
胃泌抑制肽(GIP)英文名稱:GIP ELISA Kit表面趨化因子受體4相關蛋白8抗體包裝5g
胃泌(GT)英文名稱:GT ELISA Kit硫軟骨抗體包裝100g
胃蛋白原C(PGC)英文名稱:PGC ELISA Kit上皮類癌相關抗原抗體包裝25g
胃蛋白原A(PGA)英文名稱:PGA ELISA Kit磷化蛋白磷激PKC/CPI-17抗體包裝5g
味覺受體1型成員2(TAS1R2)英文名稱:TAS1R2 ELISA Kit著絲粒蛋白K包裝100g
尾加壓2受體(UTS2R)英文名稱:UTS2R ELISA Kit腫瘤/抗原1B包裝25g
維生D受體(VDR)英文名稱:VDR ELISA Kit轉鐵蛋白受體抗體包裝5g
維生D結合蛋白(DBP)英文名稱:DBP ELISA Kit8號染色體開放閱讀框K29抗體包裝1g
維生B9(VB9)英文名稱:VB9 ELISA Kit色P450 3A4抗體包裝250mg
維X受體α(RXRα)英文名稱:RXRα ELISA Kit色CYP2D1抗體包裝5g
圍脂滴蛋白4(PLIN4)英文名稱:PLIN4 ELISA KitCD33抗體包裝1g
微粒體谷胱甘肽S轉移1(MGST1)英文名稱:MGST1 ELISA Kit視網膜母瘤結合蛋白8抗體包裝5g
彼爾姆短桿菌Brevibacterium│permense 質量規格:HPLC>98%,標準品組織蛋白G試劑盒風疹病IgG抗體參考品
銀耳Tremella│fuciformis 質量規格:含量≥98.0%組織蛋白D試劑盒風疹病IgM抗體參考品
筑波鏈霉菌Streptomyces│tsukubaensis 質量規格:HPLC≥97.0%,標準品組織蛋白C試劑盒紫堇塊莖堿;Corytuberine
kFluor555-EdU法細胞增殖檢測試劑盒(流式)雷夫松氏 1,4-二溴-2,3-二氟苯B12檢測試劑盒
白酒 酒精度 3,4,5-三氯噠維B2檢測試劑盒
桔綠木霉 2,6-吡啶二羧酸二乙酯B6檢測試劑盒
線蟲被毛孢 1-甲基-3,5-二硝基-2-吡啶酮C檢測試劑盒
枯草芽孢桿 4-氯苯乙維D檢測試劑盒
紫紅曲霉 2,4-二溴-6-氟苯維D2檢測試劑盒
釀酒酵母 2-苯乙鹽酸鹽素D3檢測試劑盒
塔賓曲霉 4-氯-3-乙基苯酚D受體檢測試劑盒
釀酒酵母 阿加曲班單水合物維E檢測試劑盒
pAAV-RC2 4-氯-2-氟苯磺酰氯維K1檢測試劑盒
蕈狀芽孢桿 己二酸二乙酯維K2檢測試劑盒
光黑腹 丁酸香茅酯尾加壓素Ⅱ相關肽檢測試劑盒
蜂房哈夫尼 酸香茅酯尾加壓素II檢測試劑盒
草木樨中華根瘤 橙花乙酸酯胃癌抗原MG7-Ag檢測試劑盒
雞葡萄球 環己烯-1-酸頻哪酯胃腸癌標志物CA199檢測試劑盒