化工儀器網
詳細介紹
產品屬性：
中文名稱：Caspase-6活性測定試劑盒
英文名稱：Caspase-6 Activity colorimetric assay Kit
產品規格：20T|50T|100T
發貨周期：1～3天
公司產品僅用于科研
商品介紹：
本試劑盒測定哺乳動物組織、細胞caspase-6活性。試劑盒測定原理基于Caspase-6特異水解其多肽底物Ac-VEID-pNA(N-acetyl-Val-Glu-Ile-Asp-p-nitroanilide)，釋放出游離的硝基pNA，后者呈黃色在405nm具有大吸收峰，用可見光分光光度比色方法測定。其吸光度值對應于Caspase-6的水解活性。 Caspase-6也稱Mch-2，其前體蛋白被granzyme B剪切后形成活化的caspase-6二聚體，可誘導細胞凋亡。細胞凋亡屬于程序化細胞死亡，可見于各種器官和細胞，在正常發育、生理、病理過程中對細胞和器官的穩態具有十分重要的調節作用。Caspase(Cysteine-requiring Aspartate Protease)是參與細胞凋亡過程的蛋白酶家族，包含10多個成員。Caspase-6也稱Mch-2，其前體蛋白被granzyme B剪切后形成活化的caspase-6二聚體，可誘導細胞凋亡。Caspase-6可剪切凋亡的關鍵調節蛋白PARP，剪切核膜上關鍵蛋白Lamin A，其對于Lamin A的識別位點是VEID。 運輸及保存：試劑常溫運輸。到達后按要求儲存，1年內穩定。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調控；
⑤細胞分化及其調控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
格列美脲(標準品)英文名稱： Tiotropium bromide hydrate 6號染色體開放閱讀框222抗體包裝1g
格列美脲雜質2（標準品）英文名稱： Amiodarone HCl熱休克蛋白58抗體包裝1g
格列美脲雜質Ⅰ/4-[2-(3-乙基-4-基-2-氧...英文名稱： Amiodarone HCl色C P450 17A1抗體包裝100g
格列齊特（標準品）英文名稱： Amotriptan malate膜蛋白CLDND1抗體包裝25g
格列齊特雜質Ⅰ/1-（3-氮雜雙環[3.3.0]辛基）...英文名稱： Vidarabine/Ara-A二氫嘧啶相關蛋白1抗體包裝5g
更昔洛韋(標準品)英文名稱： Vidarabine/Ara-A霉單克抗體包裝100ml
更昔洛韋（標準品）英文名稱： Ampicillin TrihydrateCD98重鏈抗原抗體包裝25ml
庚炔諾（標準品）英文名稱： Ampicillin Trihydrate鈣蛋白抑制蛋白抗體包裝500ml
枸櫞鉍雷尼替丁（標準品）英文名稱： Atipamezole HClcGMP依賴性蛋白激1抗體包裝1g
枸櫞己定（標準品）英文名稱： Atipamezole HCl胞漿鈣獨立磷脂A2抗體包裝100g
枸櫞莫沙比利(標準品)英文名稱： Azatadine Maleate1號染色體開放閱讀框98抗體包裝500g
枸櫞噴妥維林（標準品）英文名稱： Bambuterol HClCOX4NB蛋白抗體包裝1g
枸櫞他莫昔芬E－異構體英文名稱： Bambuterol HCl腫瘤/抗原77抗體包裝5g
枸櫞鋅（標準品）英文名稱： Benserazide HClCD81抗體包裝1g
枸櫞奧芬那君;枸芬那君(標準品)英文名稱： Canagliflozin輔Q10B抗體包裝100g
蠕形青霉Penicillium│vermiculatum 質量規格：HPLC>98%,標準品鋅指蛋白644試劑盒維生B2;Vitamin B2
芽孢桿菌Bacillus│sp. 質量規格：>98%,富馬鹽,BR鋅α2糖蛋白試劑盒維生E;Vitamin E
#白色短桿菌Curtobacterium│albidum (Komagata and Iizuka) Yamada and Komagata 質量規格：≥98%，標準品心型脂肪結合蛋白試劑盒維生C;Vitamin C
Caspase-6活性測定試劑盒普通變形桿 3-基苯酸頻哪酯盤狀結構域受體家族成員1Elisa
橙鱗傘2 正戊基三苯基溴化磷血管內皮生長因子受體1Elisa
北里胞 5-溴-3-甲基吡啶-2-甲酸甲酯血管內皮生長因子受體4Elisa
羊無漿體（青海海宴株） (三苯基亞正膦基)乙視黃Elisa
鮑姆針層孔 (S)-(-)-2-羧基環丁鱗狀癌相關抗原2Elisa
枯草芽孢桿 2-氯-6-甲酸神經營養受體P75Elisa
鼠李糖乳桿 3-溴苯基硫脲低氧誘導因子1Elisa
棘孢曲霉 4,6-二氯-5-氟嘧啶精漿彈性硬蛋白Elisa
釀酒酵母 1-芐基-2-羧酸精漿彈性硬蛋白Elisa
類阿達青霉 4-氯異硫酸苯酯糖類抗原15-3Elisa
帶小棒鏈霉 2-(3,4-二氯芐基)苯并咪唑半乳糖苷Elisa
都柏林克羅諾桿都柏林亞種 2,3-二溴-1,4-二半胱氨酰白三烯Elisa
球孢白僵 3-溴-5-氟苯乙DDX4Elisa
Sphingomonas abaci 1-萘乙酸乙酯基膜聚糖；內腔蛋白Elisa
大腸埃希 3-羥基己酸甲酯前腎Elisa
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
化工儀器網