詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
100ml | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
用途: 含有福爾馬林、甘油等。 注意事項: 推薦用于淡水藻類的保存。此類保存液不能保色,如需保色,需用此保存液作用1-2天后轉入保色液中長期保存。 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
半裸法氏殼肝結合蛋白/陽離子抗菌蛋白37/天青殺抗體Human HPCAL4 ELISA Kit小鼠基質金屬蛋白5(MMP-5)免疫試劑盒
香菇核突觸蛋白抗體Human HPDL ELISA Kit小鼠基質金屬蛋白4(MMP-4)免疫試劑盒
美澳型核果褐腐病菌β-肌動蛋白/β-Actin 抗體(內參抗體)Human HPD ELISA Kit小鼠基質金屬蛋白3(MMP-3)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌β淀粉樣肽1-42(C端)/β-Amyloid 1-42 (CT)抗體Human HPGD ELISA Kit小鼠基質金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)免疫試劑盒
球孢白僵菌β淀粉樣肽1-16/Aβ1-16抗體Human HPS1 ELISA Kit小鼠基質金屬蛋白2/明膠A(MMP2/Gel A)抗體免疫試劑盒
冷湖黃桿菌β淀粉樣肽1-28/β-Amyloid 1-28抗體Human HPGDS ELISA Kit小鼠基質金屬蛋白13(MMP-13)免疫試劑盒
金針菇激活受體2A抗體Human HPS3 ELISA Kit小鼠基質金屬蛋白10(MMP-10)免疫試劑盒
蠟樣芽孢桿菌水通道蛋白5抗體Human HPS4 ELISA Kit小鼠基質金屬蛋白1(MMP-1)免疫試劑盒
板栗蛇孢日規殼β淀粉樣肽(1-40)抗體Human HPS5 ELISA Kit小鼠基質γ羧基谷蛋白(MGP)免疫試劑盒
高加索異常倚囊霉β淀粉樣肽(1-42)抗體Human HOXC4 ELISA Kit小鼠肌激同工MM(CK-MM)免疫試劑盒
外來毛霉橙色變種載脂蛋白A1抗體Human HOXC8 ELISA Kit小鼠肌激同工MB(CK-MB)免疫試劑盒
累四菲鏈霉菌β-抑制蛋白1抗體Human HOXD11 ELISA Kit小鼠肌激(CK)免疫試劑盒
鞘桿菌屬錨定蛋白B抗體Human HOXD12 ELISA Kit小鼠肌球蛋白重鏈(MHC)免疫試劑盒
三葉草根瘤菌銅轉運蛋白質α鏈抗體Human HOMEZ ELISA Kit小鼠肌球蛋白(MYS)免疫試劑盒
谷棒桿菌單克/抗體Human HOOK3 ELISA Kit小鼠肌紅蛋白(MYO/MB)免疫試劑盒
黃灰鏈霉菌ASMTL蛋白抗體Human HOXD13 ELISA Kit小鼠肌酐(Cr)免疫試劑盒
銅綠假單孢菌Pseudomonas│aeruginose 質量規格:>99%,BR白介11試劑盒山羊豆堿
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規格:>98%,BR白介10試劑盒藤子酚
黑曲霉Aspergillus│niger 質量規格:>99.9%,AR白喉抗體試劑盒四氫黃連堿
淡水藻保存液Ⅱ糙皮側耳 3-溴-5-硝基吲唑脂肪氧化Elisa
炭疽芽胞桿 2-羥基煙酸甲酯脂肪Elisa
盤長孢狀盤孢 4-苯氧基苯甲纖維蛋白原γElisa
局限青霉 2,7-二溴-9,9-雙[3'-(N,N-二甲氨基)基] -芴葡萄糖神經酰合成Elisa
擬青霉 4-甲氧基-6-甲基-2H-吡喃-2-酮神經鞘磷脂Elisa
赭曲霉 間三氟磺酰酸性神經酰Elisa
產油油脂酵母 4--3-三氟甲苯絲氨酸棕櫚酰轉移Elisa
蘇云金芽孢桿 3,4-二甲酯酸性神經鞘磷脂Elisa
多根硬皮馬勃 6-(三氟甲基)尿嘧啶口蹄疫O型Elisa
果生鏈核盤 3-(五氟硫基)蛋白二硫化物異構A3Elisa
釀酒酵母 9-氧雜-1-氮雜-蒽-10-酚抗肌蛋白Elisa
環圈鏈霉 N-叔丁氧羰基-D-高絲氨酸單鈉鹽Fission 1蛋白Elisa
灰樹花 (R)-2-氧代四-3-基氨酸叔丁酯循環復合物Elisa
嗜中溫居冰 Diclofensine 鹽酸鹽冷誘導RNA結合蛋白Elisa
枯草芽孢桿 2-氟-3-羥基酸甲酯精脒精乙酰轉移Elisa