詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
2×20ml|2×50ml | 1~3天 |
商品介紹:
用途: 異染顆粒染色,干燥棒桿菌染色 注意事項: 異染顆粒呈黑色,菌體呈淡藍色。 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
山扁豆生棒孢α2C-AR腎上腺能受體抗體Human CAMK2B(Calcium/calmodulin-dependent protein kinase type II subunit beta) ELISA Kit豬D二聚體(D2D)免疫試劑盒
瑞氏青霉中心體蛋白AZI1抗體Human CDCA8(Cell division cycle-associated protein 8) ELISA Kit豬C肽(C-Peptide)免疫試劑盒
大麗花輪枝孢α蛋白激3抗體(心肌)Human MAP4K4 ELISA Kit豬C反應蛋白(CRP)免疫試劑盒
葡枝根霉表皮型脂氧合3抗體(魚鱗病相關蛋白)Human MAP4K5 ELISA Kit豬c-fos 免疫試劑盒
研究團隊節桿菌錨蛋白重復域28抗體Human Matrilin 2 ELISA Kit豬B淋巴瘤因子2(Bcl-2)免疫試劑盒
芽孢八疊球菌屬淋巴相關AF4樣蛋白抗體Human MAPK11(Mitogen-activated protein kinase 11) ELISA Kit豬Bcl-2相關X蛋白(BAX)免疫試劑盒
乳酒假絲酵母錨蛋白重復結構域蛋白12抗體Human MAP7 ELISA Kit豬Apelin(APLN)免疫試劑盒
玫煙色棒束孢錨蛋白重復結構域蛋白13A抗體Human MAP7 ELISA Kit豬5羥色(5-HT)免疫試劑盒
秀珍菇錨蛋白重復結構域蛋白9抗體Human MAPK12 ELISA Kit豬Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)免疫試劑盒
冷溫木拉克酵母錨蛋白重復及SAM結構域蛋白1A抗體Human MAPK4 ELISA Kit豬Ⅲ型前膠原基末端肽(PⅢNP)免疫試劑盒
樹脂殼菌脂肪特定轉錄因子2抗體Human MAPK13 ELISA Kit豬Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢNT)免疫試劑盒
金黃紅色球菌載脂蛋白L3抗體Human MAPK7 ELISA Kit豬Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)免疫試劑盒
釀酒酵母腫瘤/抗原81抗體Human MAPK6 ELISA Kit豬25羥基維生D3(25 HVD3)免疫試劑盒
芽胞桿菌共濟失調蛋白7樣2抗體Human MAPKBP1 ELISA Kit豬Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)免疫試劑盒
釀酒酵母鹽耐藥蛋白ARS2抗體Human Marcks ELISA Kit豬17羥孕(17-OHP)免疫試劑盒
約氏乳桿菌芳香基硫酯1抗體Human MAPRE2 ELISA Kit豬1,25二羥基維生D3(1,25 DHVD3)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規格:>99%,AR二試劑盒異橙黃
巴斯德畢赤酵母Pichia│pastoris 質量規格:>98%,BR轉/谷轉試劑盒月桂氮卓
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質量規格:>99%,AR別孕烯/3α,5α-四氫孕試劑盒油
異染顆粒染色液(改良Albert法)黑腐皮殼 8-甲氧基-2-甲基喹啉屋塵螨變應原Derp1 IgG抗體Elisa
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細鏈格孢 4-乙炔基甲酯肌漿;內質網鈣ATPElisa
蘋果鏈格孢 2-溴-3-(2-乙基己基)噻吩腦啡肽Elisa
小青霉 1,4-二氧六環-2-酮凝集Elisa
雙孢蘑菇 3-氟-4-溴-苯乙酮酪蛋白激2Elisa
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青色鏈霉 1-嘧啶2--4-羧酸癌標志物-CA153Elisa
褐疣柄牛肝 2,4-二-5-氟苯屋塵螨變應原Derp1 IgE抗體Elisa
枯草芽孢桿 3-甲氧基烯酸甲酯泛樣修飾因子激活1Elisa
新城疫病 3'-苯酮胰島樣生長因子結合蛋白5Elisa
黑曲霉 3-氨基-3-(3,4-二甲氧基苯基)酸IV型前膠原Elisa
裂褶 3-溴-4-甲氧基苯甲20S蛋白體Elisa
木拉克酵母屬 (S)-1-氨基-3--2-鹽酸鹽CD200分子Elisa
雞痘病 叔丁基磺酰過氧化4Elisa