詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:JC-1熒光探針
英文名稱:
產品規格:1mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
JC-1 用于檢測細胞的線粒體膜電位時常用的濃度范圍為 1~20 μg/ml,對于很多細胞適宜采用的 JC-1濃度為 10 μg/ml。 JC-1 是一種廣泛用于檢測線粒體膜電△Ψm位的理想熒光探針。JC-1染料以電勢依賴性的方式積聚在線粒體內,可以用來檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位。正常線粒體內,JC-1聚集在線粒體基質中形成聚合物,聚合物發出強烈的紅色熒光(Ex=585 nm, Em=590 nm);不健康的線粒體由于膜電位的下降或喪失,JC-1只能以單體的形式存在于胞漿中,產生綠色熒光(Ex=514 nm, Em=529 nm)。JC-1不僅可用于定性檢測,因顏色的變化可以非常直接的反映出線粒體膜電位的變化。也可以用于定量檢測,因線粒體的去極化程度可以通過紅/綠熒光強度的比例來衡量。觀察時,只需使用常規的觀察紅色熒光和綠色熒光的設置即可。 CAS:3520-43-2 分子式:C25H27Cl4IN4 分子量:652.23 儲存條件:-20℃,干燥避光,有效期一年 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
硫氧還蛋白結合蛋白2(TBP2)英文名稱:TBP2 ELISA Kit2號染色體開放閱讀框71抗體包裝1g
硫氧還蛋白還原1(TrxR1)英文名稱:TrxR1 ELISA Kit質膜微囊蛋白-1抗體包裝5g
硫肝蛋白聚糖2(HSPG2)英文名稱:HSPG2 ELISA Kit腫瘤轉移抑制蛋白1抗體包裝1ml
硫肝(HS)英文名稱:HS ELISA Kit半胱蛋白蛋白-12抗體包裝250mg
鱗狀細胞癌抗原2(SCCA2)英文名稱:SCCA2 ELISA Kit角蛋白17抗體包裝100mg
磷脂酰肌特異性磷酯Cβ1(PLCβ1)英文名稱:PLCβ1 ELISA KitCD38抗體包裝1g
磷脂酰肌蛋白聚糖4(GPC4)英文名稱:GPC4 ELISA KitCD38抗體包裝5g
磷脂酰肌蛋白聚糖1(GPC1)英文名稱:GPC1 ELISA Kit碳酐1抗體包裝25g
磷脂A2激活蛋白(PLAA)英文名稱:PLAA ELISA Kit碳酐2抗體包裝5g
磷烯式羧激1(PCK1)英文名稱:PCK1 ELISA Kit絲/蘇蛋白質激抗體包裝1g
磷張力蛋白同源物(PTEN)英文名稱:PTEN ELISA Kitα-連環蛋白抗體(鈣粘蛋白相關蛋白)Catenin α包裝100g
磷肌依賴性蛋白激1(PDPK1)英文名稱:PDPK1 ELISA Kit癌易感基因2相互作用蛋白抗體包裝25g
磷肌-3-激2α肽(PI3K2α)英文名稱:PI3K2α ELISA Kit質連接蛋白1抗體包裝5g
磷二酯12(PDE12)英文名稱:PDE12 ELISA Kit盤狀結構域受體蛋白2抗體包裝1g
淋巴細胞趨化因子(Lptn)英文名稱:Lptn ELISA Kit膜糖蛋白CD200抗體包裝25g
埃希氏菌Escherichia│sp. 質量規格:純度大于98.5%,BR中性粒防御3試劑盒紫菀;shionone
豌豆根瘤菌Rhizobium│leguminosarum 質量規格:HPLC>98%,標準品中性粒防御1-3試劑盒紫花前胡苷;nodakenin
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規格:>98%,合物,BR中心體紡錘體相關蛋白1試劑盒獐牙菜苷;Sweroside
JC-1熒光探針梨形毛霉 1-氯乙基異基碳酸酯(1-氯乙基碳酸異酯)游離脂肪酸Elisa
假黃單胞屬 2,4,7,9-四甲基-5-癸炔-4,7-二誘導型NO合Elisa
凍土毛霉 3-氯異煙酸甲酯魚精蛋白Elisa
兩歧雙歧桿 4--2-甲氧基吡啶鳶尾Elisa
球形節桿 4,4,5,5-四甲基-2-(2-甲基-1-烯-1-基)-1,3,2-二氧戊環原癌基因pokemoElisa
黃孢紫紅菇 3,5-二氯-4-氟原鈣粘蛋白18Elisa
希瓦氏* 4-氨基-3,5-二吡啶孕二Elisa
釀酒酵母 4-乙氧基-3-氟苯酚孕誘導阻斷因子Elisa
果生鏈核盤 1-氨基-1-環丁基羧酸鹽酸鹽孕酮Elisa
短芽孢桿 3-氨基-5-氯-2-羥基吡啶孕酮受體Elisa
東方伊薩酵母 5-溴噻吩-2-甲酰肼載脂蛋白A1Elisa
尖孢鐮刀 2-甲基-5-基吡載脂蛋白A2Elisa
委內瑞拉鏈霉 5-溴-2,3-二氯吡啶載脂蛋白A4Elisa
新疆鹽地桿 5-二氟甲氧基-2-巰基-1H-苯并咪唑載脂蛋白B100Elisa
球孢枝孢 3-溴-5-甲基-4-吡啶載脂蛋白B48Elisa