黃色標(biāo)本保色液公司正在出售的產(chǎn)品：HSP-27/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記熱休克蛋白27抗體IgG鎢粉 99.98% metals basis,1-5μm
P-fscn1/FITC 熒光標(biāo)記化纖維束蛋白同源物1/肌動(dòng)蛋白集束蛋白/圓線蟲紫癜 抗體IgG硒 99%
PG-C/FITC 熒光標(biāo)記胃蛋白原C抗體IgG硫 ACS
PGC-1 Alpha/FITC 熒光標(biāo)記過氧化物體增殖物激活受體γ輔

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

淡紫灰鏈霉菌骨架銜接蛋白BIN3抗體Human GEF-H1 ELISA Kit小鼠opiorphin 免疫試劑盒

假絲酵母屬雙向染色體分裂蛋白1抗體Human GDPD5 ELISA Kit小鼠N-乙酰基-絲酰-天門冬酰-賴酰-脯(AcSDKP)免疫試劑盒

產(chǎn)氣莢膜梭菌 D型轉(zhuǎn)錄因子Brn3蛋白抗體Brn3αHuman GFPT1 ELISA Kit小鼠N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷(NAG)免疫試劑盒

泡盛曲霉骨形態(tài)發(fā)生蛋白6抗體Human GDPD2 ELISA Kit小鼠N端前腦鈉(NT-proBNP)免疫試劑盒

磚紅鐮孢菌腦鈉抗體Human GEFT ELISA Kit小鼠NANOG同源域蛋白(NANOG)免疫試劑盒

猴假單胞菌骨形態(tài)發(fā)生蛋白3抗體Human GEM ELISA Kit小鼠NAD依賴性蛋白脫乙酰sirtuin-1(SIRT1)免疫試劑盒

毛柄金錢菌(金針菇)抑凋亡基因bag1抗體Human GEMIN5 ELISA Kit小鼠NADPH氧化1(NOX1)免疫試劑盒

阿魏側(cè)耳蛙皮受體3抗體Human GEMIN4 ELISA Kit小鼠M型肌激(CKM)免疫試劑盒

大豆慢生根瘤菌骨形態(tài)發(fā)生蛋白8抗體Human GEMIN6 ELISA Kit小鼠MAP激活化蛋白激2(MAPKAPK2)免疫試劑盒

牡丹擬盤多毛孢菌骨形態(tài)發(fā)生蛋白6抗體Human GEMIN7 ELISA Kit小鼠L選擇(L-Selectin/CD62L)免疫試劑盒

黑曲霉磷化Bcl-2抗體Human GEMIN4 ELISA Kit小鼠L-乳脫氫A鏈(LDH-A)免疫試劑盒

植物乳桿菌磷化Bcl-2抗體Human GDAP2 ELISA Kit小鼠L解(PAL)免疫試劑盒

谷棒桿菌磷化Bcl-xL蛋白抗體Human GDAP1L1 ELISA Kit小鼠Klotho 免疫試劑盒

大腸埃希氏菌神經(jīng)母瘤相關(guān)蛋白ARID3B抗體Human GDE1 ELISA Kit小鼠KI-67抗原(MKI67)免疫試劑盒

凍干粉  產(chǎn)腸大腸埃希氏菌（陽性） 微管蛋白β4抗體Human GDAP1L1 ELISA Kit小鼠I型膠原蛋白免疫試劑盒

光滑青霉霍亂腸β鏈抗體Human GBP4 ELISA Kit小鼠III型前膠原基末端肽(PⅢNP)免疫試劑盒

考克氏菌Kocuria│sp. 質(zhì)量規(guī)格：BRβ2糖蛋白試劑盒芹糖異甘草苷

匍枝根霉Rhizopus│stolonifer 質(zhì)量規(guī)格：BRβ1腎上腺能受體試劑盒芹菜-7-0-（2G-鼠李糖）龍膽糖苷

土曲霉原變種Aspergillus│terreus var. terreus 質(zhì)量規(guī)格：>98% (HPLC),BCβ1,4-N-乙酰基半乳糖轉(zhuǎn)移2試劑盒5-羥色
黃色標(biāo)本保色液嗜酸乳桿 3-甲硫基酸CXC趨化因子配體5Elisa

地衣芽孢桿 6-喹啉-8-甲酸CXC趨化因子配體9Elisa

堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿 1,5-環(huán)辛二烯(吡啶)(三環(huán)己基磷化氫)銥六氟磷酸鹽CXC趨化因子受體3Elisa

麥根腐平臍蠕孢 酰CXC趨化因子受體4Elisa

釀酒酵母 2-溴-4-甲氧基-5-芐氧基苯甲C-反應(yīng)蛋白Elisa

側(cè)耳 4'-異基苯乙酮C肽Elisa

釀酒酵母 4-溴-2,3-二氟苯甲Dickkopf 1Elisa

Leucobacter aerolatus  3-羥甲基吡咯烷鹽酸鹽Dickkopf 1抗體Elisa

氈毛青霉 N-[4-(2-乙酰基)苯基]甲磺酰Dickkopf 2Elisa

云芝栓孔（變色栓） 去甲氨噻肟酸乙酯DNA甲基化轉(zhuǎn)移Elisa

釀酒酵母 甘氨熊脫氧膽酸DNA甲基轉(zhuǎn)移1Elisa

溶桿 4-氟-3-甲氧基苯DNA甲基轉(zhuǎn)移3AElisa

釀酒酵母 3-氨基-5-甲氧基吡啶D二聚體Elisa

蚜蟲莫氏黑粉 4-異惡唑甲酸D-木糖Elisa

馬德里青霉 2-甲基噻唑-4-甲酸乙酯D-乳酸Elisa