商品介紹:
TGR5Receptor Agonist是TGR5(GPCR19)激動劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1197300-24-5 純度:99.86% 分子式:C??H??Cl?N?O? 分子量:361.22 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
赭鱗蘑菇溶菌抗體Human PEX7 ELISA Kit維生A(VA)ELISA Kit
產(chǎn)氣腸桿菌蚓激抗體Human TNMD(Tenomodulin) ELISA Kit微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA Kit
簇生黃韌傘瘦抗體Human PFDN4 ELISA Kit微管相關(guān)蛋白2(MAP-2)ELISA Kit
粉紅單端孢瘦受體抗體Human PFDN5 ELISA Kit微管相關(guān)蛋白1A/1B輕鏈3B(MAP1LC3B)ELISA Kit
灰樹花瘦受體抗體(長)Human PFKFB2 ELISA Kit微管相關(guān)蛋白1A/1B輕鏈3A(MAP1LC3A)ELISA Kit
大腸埃希氏桿菌晚期包膜蛋白1抗體Human PGAP1(Post-GPI attachment to proteins factor 1) ELISA Kit微管微絲交聯(lián)因子1(MACF1)ELISA Kit
華麗側(cè)耳(佛羅里達(dá)側(cè)耳)富含亮樣性核蛋白抗體Human PFKFB3 ELISA Kit微管多特異性有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(ABCC3)ELISA Kit
蘑菇晚期包膜蛋白2B抗體Human PEX5 ELISA Kit微管多特異性有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(ABCC2)ELISA Kit
紅冬孢酵母脂肪家庭成員K抗體Human PEX5L ELISA Kit網(wǎng)膜(omentin)ELISA Kit
寇氏隱甲藻白血病相關(guān)蛋白18/癌蛋白18抗體Human PFTK1 ELISA Kit晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)ELISA Kit
三葉草根瘤菌無腦回的致病基因LIS1抗體Human PEX7 ELISA Kit晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE/AGER)ELISA Kit
大腸埃希氏菌溶體相關(guān)膜蛋白3抗體Human PFDN1 ELISA Kit晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA Kit
靈芝亮腦啡肽抗體Human PFDN4 ELISA Kit外顯肽(extein)ELISA Kit
腸膜明串珠菌自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體Human TNMD(Tenomodulin) ELISA Kit蛙皮(BBS)ELISA Kit
假單胞菌指甲髕骨綜合征相關(guān)蛋白NPS1抗體Human PFDN5 ELISA Kit唾液(SA)ELISA Kit
易脆毛霉自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈β3抗體Human PES1 ELISA Kit唾液過氧化物(SP)ELISA Kit
: =JCM13563資源名稱: 棲污泥鹽土生古菌 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)常春藤皂苷B
蚜蟲擬酵母Pseudozyma│aphidis 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)竹節(jié)香附A
海底嗜冷桿菌Psychrobacter│submarinus 質(zhì)量規(guī)格:用于配位滴定銅時的指示劑五加苷E
GPCR19激動劑(TGR5 Receptor Agonist)Collagen I Ⅰ型膠原抗體碳化鈦 99%,40nm
Collagen II Ⅱ型膠原抗體碳化鈦 99.99% metals basis
Collagen III 抗Ⅲ型膠原抗體無水三化鐵 ≥99.9% metals basis
Collagen III 抗Ⅲ型膠原抗體無水三化鐵 AR,98%
Collagen IV 抗IV型膠原抗體1,2,4,5-四 95%
Collagen VI 抗Ⅵ型膠原抗體酯 AR,99%
Collagen VII Ⅶ膠原抗體酯 CP,98%
Collagen V Ⅴ型膠原抗體肟 99%