詳細介紹
商品介紹:
Rolipram是一種選擇性的磷酸二酯酶PDE4抑制劑,抑制PDE4A,PDE4B和PDE4D,IC50分別為3nM,130nM和240nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:61413-54-5 別名:(R,S)-Rolipram;SB 95952;ZK 62711 純度:99.56% 分子式:C??H??NO? 分子量:275.34 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Rolipram | 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
宇佐美曲霉染色體及有絲分裂蛋白MIS12抗體Human GDF5(Growth/differentiation factor 5) ELISA Kit淋巴β(LTB)ELISA Kit
有柄樹舌靈芝(白芝)單羧轉運蛋白-1抗體Human HSPG2(Basement membrane-specific heparan sulfate proteoglycan core protein) ELISA Kit淋巴α(LTA)ELISA Kit
異常漢遜酵母線粒體核糖體蛋白L11抗體Human TEP1(omerase protein component 1) ELISA Kit亮腦啡肽(LEK)ELISA Kit
葡萄座腔菌促血管平滑肌分化因子抗體Human CSTA(Cystatin-A) ELISA Kit亮酰-半胱酰肽(LNPEP)ELISA Kit
枯草芽孢桿菌跨膜結構域4亞家族成員2抗體Human HBA1(Hemoglobin subunit alpha) ELISA Kit亮酰基肽(LAP)ELISA Kit
鳥乳桿菌不解棉子糖亞種磷化致癌基因C-Myc抗體Human SULF2(Extracellular sulfatase Sulf-2) ELISA Kit亮富含重復絲/蘇蛋白激2(LRRK2)ELISA Kit
膠紅酵母肌收縮蛋白MYOT抗體Human STEAP1(Metalloreductase STEAP1) ELISA Kit亮基肽3(LAP3)ELISA Kit
簡單芽孢桿菌磷化絲裂原活化蛋白激MAP4K4抗體Human HIF1AN(Hypoxia-inducible factor 1-alpha inhibitor) ELISA Kit鏈激(SK)ELISA Kit
pQE70環指蛋白59抗體Human NAA20(N-alpha-acetyltransferase 20) ELISA Kit連蛋白(zonulin)ELISA Kit
橙色單胞菌磷化絲裂原活化蛋白激MAP4K4抗體Human DPP10(Inactive dipeptidyl peptidase 10) ELISA Kit粒特異性抗核抗體(GS-ANA)ELISA Kit
大腸埃希菌甲羥戊激抗體Human SOX9(Transcription factor SOX-9) ELISA Kit粒趨化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)ELISA Kit
糞腸球菌甲羥戊脫羧抗體Human AMD1(S-adenosylmethionine decarboxylase proenzyme) ELISA Kit粒巨噬集落激因子抗體(GM-CSF Ab)ELISA Kit
路德類酵母胞漿蘋果1抗體Human SLC25A5(ADP/ATP translocase 2) ELISA Kit粒巨噬集落激因子(GM-CSF)ELISA Kit
大腸埃希氏菌(大腸桿菌)組織相容性復合體蛋白1抗體Human NOTCH1(Neurogenic locus notch homolog protein 1) ELISA Kit粒集落激因子(G-CSF)ELISA Kit
地衣芽孢桿菌微絲相關蛋白3樣抗體Human MIOX(Inositol oxygenase) ELISA Kit利什曼原蟲抗體(Leishimaria Ab)ELISA Kit
核盤菌微粒體甘油三酯轉運蛋白Human VDR(Vitamin D3 receptor) ELISA Kit利鈉肽(ANP)ELISA Kit
: ATCC53432資源名稱: 運動發酵單胞菌 質量規格:>99%,標準品芍藥苷
惡臭假單胞菌Pseudomonas│putida 質量規格:>98%,BR蕓香柚皮苷
: 399資源名稱: 黃麻鏈霉菌 質量規格:>99%,分子生物學級飛薊賓
磷酸二酯酶PDE4抑制劑(Rolipram)ATEXPA10 植物延長蛋白(擬南芥)鐿粉 99.9%
Ezrin/Radixin 埃茲蛋白抗體茜紅 AR,≥80.0%(HPLC)
Phospho-Ezrin (Tyr353) 化埃茲蛋白抗體茜黃GG IND
Phospho-Ezrin (Thr567) 化埃茲蛋白抗體茜黃R AR
F1 operon positive regulatory protein(NT) 肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體(N端)藍6B IND
F1 operon positive regulatory protein(CT) 肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體(C端)天青I Biological stain
intestinal FABP/IFABP 腸型脂肪結合蛋白抗體天青I 94%
FABP(brain) CT 腦型脂肪結合蛋白抗體(C端)天青Ⅱ Biological stain