以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Trk/ROS1/ALK抑制劑 | Entrectinib | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
英文名稱:Entrectinib 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg Entrectinib是有效的Trk,ROS1,和ALK抑制劑;抑制TrkA,TrkB,TrkC,ROS1和ALK的IC50值分別為1,3,5,12和7nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1108743-60-7 別名:NMS-E628;RXDX-101 純度:98.42% 分子量:560.64 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
戈盧別夫氏酵母酪蛋白激受體A7抗體Human MKX(Homeobox protein Mohawk) ELISA Kit人c-sis 免疫試劑盒
海棲鏈格孢酪蛋白激受體B1抗體Human MSGN1 (Mesogenin-1) ELISA KIT人Corin 免疫試劑盒
構(gòu)巢曲霉磷化酪蛋白激受體B1抗體Human MPV17L2 (Mpv17-like protein 2) ELISA KIT人COP9 結(jié)構(gòu)光形態(tài)發(fā)生同源物亞基2(擬南芥)(COPS2)免疫試劑盒
李季倫氏環(huán)桿菌磷化酪蛋白激受體B1抗體Human MAVS (Mitochondrial antiviral-signaling protein) ELISA KIT人COLL2-1NO2 免疫試劑盒
紫色游動(dòng)放線菌對(duì)接蛋白EFS抗體Human MBLAC2 (Metallo-beta-lactamase domain-containing protein 2) ELISA KIT人Coll2-1 免疫試劑盒
藍(lán)綠小四孢菌酪蛋白激A5受體抗體Human MTCH1 (Mitochondrial carrier homolog 1) ELISA KIT人c-jun 免疫試劑盒
根瘤菌內(nèi)皮分化G蛋白偶聯(lián)受體8抗體Human LTK(Leukocyte tyrosine kinase receptor) ELISA Kit人chemerin 免疫試劑盒
百脈根中間根瘤菌神經(jīng)鳥(niǎo)苷置換因子NGEF抗體Human MSMP(Prostate-associated microseminoprotein) ELISA Kit人c-fos 免疫試劑盒
黑曲霉磷化真核啟動(dòng)因子2α抗體Human MCPH1 (Microcephalin) ELISA KIT人CDCP1(CDCP1)免疫試劑盒
納西桿菌屬長(zhǎng)鏈脂肪延長(zhǎng)ELOVL2抗體Human PSG11(Pregnancy-specific beta-1-glycoprotein 11) ELISA Kit人CD8分子(CD8)免疫試劑盒
乳乳球菌乳亞種長(zhǎng)鏈脂肪延長(zhǎng)長(zhǎng)ELOVL5抗體Human MASTL (Serine/threonine-protein kinase greatwall) ELISA KIT人CD82分子(CD82)免疫試劑盒
棘孢曲霉有脊椎動(dòng)物腦發(fā)育相關(guān)蛋白Emx1抗體Human MID2 (Probable E3 ubiquitin-protein ligase MID2) ELISA KIT人CD73分子(CD73)免疫試劑盒
絳紅鏈霉菌外胚層神經(jīng)皮層蛋白1抗體Human MSTO1 (Protein misato homolog 1) ELISA KIT人CD6分子(CD6)免疫試劑盒
表皮葡萄球菌烯化超家族成員1抗體Human MIIP (Migration and invasion-inhibitory protein) ELISA KIT人CD68分子(CD68)免疫試劑盒
色鹽桿菌核苷內(nèi)焦磷/磷二酯1抗體Human MSGN1 (Mesogenin-1) ELISA KIT人CD63分子(CD63)免疫試劑盒
球形賴芽孢桿菌內(nèi)皮活化蛋白受體抗體Human LTK(Leukocyte tyrosine kinase receptor) ELISA Kit人CD5分子樣蛋白(CD5L)免疫試劑盒
小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=3%基異茜草
: A55資源名稱: 產(chǎn)色鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品長(zhǎng)春瑞濱
ATCC23299=CCM2175=NCIB11433資源名稱: 異常芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,97%脫長(zhǎng)春堿
Trk/ROS1/ALK抑制劑地芽孢桿屬 羥基檸檬酸Bcl-2相關(guān)X蛋白Elisa
棉毛狀嗜熱霉 3-氟-4-(三氟甲基)苯甲B瘤因子2Elisa
栗色針孔 1-(3-氨基基)吡咯烷γ干擾Elisa
毛柄(金針菇) 3-溴-4-羥基苯甲白介12Elisa
抗輻射不動(dòng)桿 1-(3-芐基)哌白介2Elisa
枯草芽孢桿 N-基-4-酮蛋白酪氨酸激Elisa
白磷蘑菇 2,6-二甲氧基苯酸核因子κBElisa
枯草芽孢桿 6-吡啶-3-甲環(huán)氧合2Elisa
釀酒酵母 3,4-二甲氧基苯磺酸基質(zhì)金屬蛋白2Elisa
Microbacterium flavum 5-溴-2-甲氧基苯磺酰基質(zhì)金屬蛋白9Elisa
哈茨木霉 鹽酸甲苯噻可溶性MHC-I鏈相關(guān)基因AElisa
產(chǎn)紫青霉 2--5-甲基-3-硝基吡啶前列腺特異性抗原Elisa
腸膜明串珠 2--4-硝基吡啶去甲腎上腺Elisa
歧異假絲酵母 2--4-甲基-5-硝基吡啶腎上腺Elisa
焦土鏈霉 3-羥基己酸乙酯雄受體Elisa